甲羟戊酸对人系膜细胞增殖及p38MAPK信号通路的影响

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目的探讨甲羟戊酸(Mev)对人系膜细胞(HMC)增殖及丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的影响及其机制。方法本研究采用常规体外培养HMC:①随机分为两组,对照组,Mev组。Mev组设1nmol/L、10nmol/L、100nmol/L、1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L、1mmol/L 7个浓度段。对促增生最明显的Mev组,分别于12、24、48h检测Mev对HMC的增殖程度。通过MTT法测定Mev对10%胎牛血清刺激的HMC增殖的影响。②随机分为四组,对照组、Mev组、Mev+SB203580组和SB203580组。以酶联免疫吸附法(ELISA)检测Mev刺激后MAPK通路下游TGF-β的表达。以Westernblot法检测Bax和Bcl-2及p38的表达。结果①Mev对HMC增殖有促进作用,且作用呈一定的浓度依赖性和时间依赖性。②Mev组与对照组相比,TGF-β的表达增高(P<0.05)。在Mev组加入特异性阻滞剂SB203580后,TGF-β的表达较Mev组无明显影响。③Mev组与对照组相比,p38的表达无明显差异。Mev+SB203580组较Mev组相比表达下降(P<0.05)。④Mev组较对照组相比Bax表达降低(P<0.05)。Mev+SB203580组Bax表达较Mev组相比无明显影响。⑤Mev组较对照组相比Bcl-2表达增加(P<0.05)。Mev+SB203580组与Mev组相比Bcl-2表达无明显影响。结论在本实验条件下1.Mev能促进HMC的增殖,并呈现浓度依赖性和时间依赖性。2.Mev可使TGF-β表达增加,加入p38MAPK特异性阻断剂SB203580后TGF-β表达无明显下降。3.Mev诱导的通路下游Bax和Bcl-2的表达的变化与p38MAPK通路之间无明显相关。
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