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以转基因小黑杨的DNA为模板,进行扩增T-DNA的侧翼片断。结果表明在含有多拷贝外源基因的转基因小黑杨中,第一种情况是两相邻T-DNA存在头对尾方式的整合模式,整合后左右边界均有不同程度的缺失。右边界断裂位点是G,缺失23bp(ACAGGATATATTGGCGGGTAAAC);左边界缺失13bp(TGGCAGGATATAT),断裂位点是T。第二种为相邻两T-DNA之间有序列插入的头对尾整合方式,插入的片段为T-DNA上的外源基因Cry1A(b)的部分片段,长为334bp。T-DNA右边界缺失了19bp(GATATATTGGCGGGTAAAC),左边界缺失7bp(TGGCAGG)。T-DNA左、右边界整合处杨树DNA序列富含A+T,分别为62.07%和72.11%。右边界缺失22bp(CAGGATATATTGGCGGGTAAAC),左边界缺失13bp(TGGCAGGATATAT)。本文研究了一种检测转基因杨树的通用方法,以及转基因小黑杨中外源基因的整合方式。根据T-DNA上nos终止子的序列设计引物,开发出一种检测转基因杨树的semi-nested PCR方法,具有快速、简便和可靠等特点。根据T-DNA序列和克隆T-DNA旁侧植物DNA序列来设计引物,通过PCR扩增即可区分不同的转基因株系。本文初步研究了转基因单倍体小黑杨对天幕毛虫幼虫的抗性,表明该转基因小黑杨可延缓天幕毛虫幼虫发育,与对照相比转基因株系TT1和TT3分别使1～3龄的幼虫发育延缓1.24d和2.92d;取食TT1 8～19d的幼虫平均体重与对照相比分别下降1.42%～17.37%、取食TT3 8～19d幼虫平均体重分别下降了10.77%～24.80%;取食TT14～18d幼虫的校正死亡率分别为9.52%～49.32%、取食TT3 4～18d幼虫的校正死亡率分别为11.11%～52.70%。取食转基因植株TT1幼虫的蜕皮指数2.969～3.769、毒力为0.010～0.026,取食转基因植株TT3幼虫的蜕皮指数2.906～3.714、毒力为0.032～0.041。