目的：研究抑制性受体LAIR-1在子宫癌和卵巢癌患者中的表达,探讨LAIR-1表达与肿瘤免疫逃逸的相关性以及LAIR-1表达与卵巢癌患者临床病理特征的相关性；构建LAIR-1shRNA慢病毒载体,通过沉默LAIR-1在人卵巢癌细胞系的表达,进一步探讨LAIR-1表达对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响。以期为肿瘤的诊断和治疗提供新的理论和实验依据。方法：(1)采用Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs),流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析LAIR-1分子在宫颈癌、宫体癌(子宫内膜癌)、子宫肌瘤及癌前病变患者外周血T细胞表面的表达水平。(2)利用免疫组化EliVisionTM法和组织芯片技术检测LAIR-1分子在卵巢癌组织、淋巴结转移组织以及边缘组织中的表达情况。(3)通过逆转录PCR (Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)、实时荧光定量PCR(Real Time PCR)、Western Blot、激光扫描共聚焦显微技术(laser scanning confocal microscopy, LSCM)和流式细胞术分别从基因和蛋白水平检测LAIR-1分子在卵巢癌细胞系上的表达和定位。(4)构建人的LAIR-1(CD305)-shRNA慢病毒干扰载体,并利用293T细胞进行慢病毒包装,然后用CD305-shRNA慢病毒转染人的浆液性卵巢癌细胞系H08910和粘液性卵巢癌细胞系COC1,通过Real Time PCR和Western Blot验证LAIR-1的沉默效果,最终筛选并建立LAIR-1沉默效果最好的H08910和COC1稳定细胞株。(5)采用CCK-8法和AnnexinV-PE流式细胞术分别检测沉默LAIR-1表达对H08910和COC1细胞增殖和凋亡的影响。结果：(1)在妇科肿瘤患者的外周血中,宫颈癌和子宫内膜癌患者CD3+CD4+T细胞表面LAIR-1阳性率均高于子宫肌瘤(P<0.05)和癌前病变患者(P<0.01),平均荧光强度分析结果显示宫颈癌患者外周血CD3+CD8+T细胞LAIR-1表达水平显著高于子宫肌瘤(P<0.05)和癌前病变患者(P<0.001), CD3+CD4+T细胞LAIR-1表达水平也显著高于癌前病变患者(P<0.01)；子宫内膜癌患者外周血CD3+CD8+T细胞LAIR-1表达水平高于癌前病变患者(P<0.05), CD3+CD4+T细胞LAIR-1表达水平明显高于子宫肌瘤(P<0.05)和癌前病变患者(P<0.01)。(2)组织芯片检测结果显示,LAIR-1主要表达在卵巢癌及淋巴结转移组织肿瘤细胞的胞浆和胞核,而正常卵巢组织和边缘组织LAIR-1表达阴性。统计分析结果显示,LAIR-1的表达与卵巢癌患者临床病理特征存在相关性。LAIR-1在Ⅱ和Ⅲ期卵巢癌细胞阳性率高于Ⅰ期(P<0.01)；在淋巴结及远处转移卵巢癌中LAIR-1的阳性率高于无转移卵巢癌(P<0.05)；LAIR-1在卵巢癌T1期的阳性率高于T2和T3期(P<0.05)。(3)基因及蛋白水平检测结果显示人浆液性卵巢癌细胞系H08910表达LAIR-1,且主要分布于胞浆区。人粘液性卵巢癌细胞系COC1高表达LAIR-1且主要分布于细胞膜。基因测序结果显示COC1细胞表达的LAIR-1基因序列与GenBank已登录的人LAIR-1a基因序列完全相同。(4)成功构建了CD305-shRNA慢病毒载体并完成慢病毒的包装,转染H08910和COC1细胞后建立了沉默LAIR-1分子表达的稳定H08910和COC1细胞株。Real TimePCR和Western Blot检测结果证实CD305-shRNA能够高效沉默H08910细胞LAIR-1分子的表达。(5)沉默LAIR-1分子表达后,CD305-shRNA HO8910组细胞的增殖率明显高于NC-shRNA HO8910组的(P<0.0001),而凋亡率无明显变化(P>0.05); CD305-shRNACOCl组和NC-shRNA组细胞的增殖率和凋亡率均无明显差别(P>0.05)。结论：(1) LAIR-1在子宫癌患者外周血T细胞表面表达上调,可能与肿瘤免疫逃逸存在相关性。(2) LAIR-1在卵巢癌肿瘤细胞上表达,并且与卵巢癌的临床病理特征存在相关性,其可能在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用。(3)LAIR-1在人的卵巢癌细胞系COC1和H08910均有表达,且COC1高表达LAIR-1.(4)建立了高效沉默LAIR-1分子表达的人浆液性卵巢癌细胞CD305-shRNA HO8910稳定细胞株。(5)卵巢癌细胞H08910表达LAIR-1分子,能够抑制细胞的增殖,但对细胞凋亡无明显影响。