阳离子脂质体包裹可溶性蛋白诱导抗急性白血病CTL的实验研究

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目的: 探索用阳离子脂质体包裹可溶性蛋白抗原诱导抗急性白血病的细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)的作用,为阳离子脂质体包裹可溶性蛋白抗原在急性白血病微小残留病治疗上的应用提供理论依据。方法: 体外培养树突状细胞,并通过形态、表型及功能进行综合鉴定。运用超声波-冻干法制备出干燥的阳离子脂质体,再用它包裹急性粒细胞白血病细胞可溶性蛋白抗原。分别用阳离子脂质体包裹可溶性抗原和可溶性抗原致敏树突状细胞(DC),诱导出特异性CTL,并比较其MTT法测定的CTL活性。结果:(1)用密度梯度离心加细胞因子的方法从人骨髓单个核细胞诱生DC细胞,通过形态、表型及功能进行综合鉴定,证明为成熟DC。(2)利用卵磷脂、硬脂酰胺、胆固醇三种脂质,采用超声波-冻干法法制备出空白干燥的阳离子脂质体,并成功包裹可溶性蛋白抗原。(3)在效应细胞:靶细胞分别为20:1,5:1时,CTL活性分别为:脂质体包裹的抗原组69.96%士5.42%和52.90%士8.88%;可溶性蛋白抗原组38.83%士5.42%和35.69%士5.92%;对照组1为20.74%士5.37%和14.30%士5.57%;对照组2为16.32%士6.11%和11.30%士 6.97%。经SPSS10.0版软件包进行统计学处理,脂质体包裹的抗原组高于可溶性蛋白抗原组(P < 0.05)。脂质体包裹的抗原组,可溶性蛋白抗原组高于不加抗原的两组(P < 0.05)。不加抗原的两个组之间无统计学差异(P ? 0.05)。脂质体包裹的抗原诱导的CTL活性最强,其次是抗原诱导组。(4)不同效靶比CTL活性比较无显著性差异 (P>0.05)。结论:骨髓单个核细胞在体外可诱生为成熟DC。空白干燥的阳离子脂质体 <WP=14>可以成功包裹可溶性蛋白抗原。用阳离子脂质体包裹可溶性蛋白抗原诱导抗急性白血病的CTL活性高于可溶性蛋白抗原诱导的,在急性白血病微小残留病治疗上是一种实用而有效的免疫治疗方法。
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