本论文采用一系列分子生物学的方法对具有厌氧氨氧化功能的ASBBR反应器中的污泥进行微生物的定性分析,建立了定量分析的体系,以期为反应器的运行状况和反应机理提供技术支持。　　首先采用MPfastDNAspinKit(forsoil)试剂盒提取DNA,然后设计特异性引物进行PCR扩增;将PCR扩增得到的产物进行变性梯度凝胶电泳(DGGE),可以反映活性污泥中微生物的多样性;并将清晰的条带(优势菌)割胶回收,回收的产物再次PCR,送至上海生工进行克隆和测序,并要求返还质粒;将得到的序列进行BLAST比对,建立系统发育树,达到对厌氧氨氧化细菌的定性分析;用质粒做实时定量PCR,先建立标准曲线,今后便可作为其他样品定量的标准,以达到定量的目的。　　实验结果表明:ASBBR反应器的污泥里同时存在着厌氧氨氧化菌和好氧氨氧化菌。通过变性梯度凝胶电泳(DGGE)观察了两种菌的多样性,发现好氧氨氧化菌的种类比厌氧氨氧化菌的种类多。将厌氧氨氧化菌的图谱上两条优势条带进行割胶回收、克隆并测序。结果表明,这两个样品的序列完全相同;将测得的序列提交GenBank数据库,进行BLAST比对,并建立系统发育树,发现与GenBank上已经公布的厌氧氨氧化菌同属分支很深的浮霉细菌(planctomycete(AJ131819))的同源性为99％,可以认为是浮霉菌属的一种。将好氧氨氧化菌图谱上的两条优势条带进行克隆和测序,得出两种不同的序列,发现这两种菌均属于氨单加氧酶。因此ASBBR反应器中存在的厌氧氨氧化菌和好氧氨氧化菌存在着协同作用:原水中带入反应器中的氧气可由好氧氨氧化细菌消耗,把氨氮转化为亚硝酸盐;氧气消耗完后,厌氧氨氧化细菌则利用剩余的氨和亚硝酸盐进行anammox反应。因而,反应器中的氨氮与亚硝酸盐的转化比值为1.30,低于理论的anammox反应计量比1.32。　　对厌氧氨氧化菌的图谱上两条优势条带克隆后,将其中一个样品做实时定量PCR,建立了标准曲线,可用于其它厌氧氨氧化污泥的定量分析。　　厌氧氨氧化工艺以其无需氧气、无需有机物、产泥少等优点而具有广阔的应用前景,但由于厌氧氨氧化细菌的生长非常缓慢,不能通过传统的微生物技术培养,因此采用分子生物学的方法来研究厌氧氨氧化细菌的生理和动力学,可以为今后厌氧氨氧化工艺的工程应用提供实时、简便、可信的监控手段。