氨基脲敏感型胺氧化酶(Semicarbazide-sensitive amine oxidase, SSAO; EC1.4.3.6)是一组含铜胺氧化酶的统称,广泛分布于器官和组织中,尤其在脂肪细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞中酶活性较高,它的可溶性形式也存在于血浆中。脂肪细胞和平滑肌细胞表达的SSAO酶可促进葡萄糖转运,具有类胰岛素效应;而内皮细胞表达的SSAO酶即血管黏附蛋白-1(VAP-1)参与炎症过程中白细胞的运输与外渗。生化方面,SSAO催化伯胺的氧化脱胺生成相应的醛、氨和过氧化氢(RCH2NH2 + O2 + H2O→RCHO + NH3 + H2O2)。有研究表明在离体肺缺血再灌注损伤模型中SSAO参与过多活性氧族的生成。然而SSAO在心肌缺血再灌注损伤中是否起作用尚未见报道。因此,我们用大鼠缺血再灌注模型来验证这一假设。所有SD大鼠心脏都给予缺血30 min再灌注180 min的处理。所有大鼠随机分成八组,每组十只:1)缺血再灌注对照组:缺血前后不给予任何干预;2)氨基脲处理组:实验前10 min给予氨基脲(30 mg/kg,溶解于1 ml生理盐水)处理;3)缺血预适应组:长时间缺血前给予5 min缺血10 min再灌注;4)缺血预适应+氨基脲处理组:实验前10 min给予氨基脲处理,然后长时间缺血前给予5 min缺血10 min再灌注;5)缺血后适应组:长时间再灌注前给予3个循环10 s再灌注和10 s再缺血的后处理。6)缺血后适应+氨基脲处理组:实验前10 min给予氨基脲处理,然后长时间再灌注前给予3个循环10 s再灌注和10 s再缺血的后处理。7)假手术组:实验过程同其他组,但穿线不结扎。8)假手术+氨基脲处理组:实验前10 min给予氨基脲处理,然后穿线不结扎。在本实验中,采用NBT(氯化硝基四氮唑兰)染色法测定心肌梗塞范围;比色法测定大鼠血浆肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、羟自由基(·OH)等水平;高效液相色谱法测定血浆SSAO酶活性;HE染色法进行组织学评估。在本实验中我们得到如下结果:(1)各组的心肌梗塞范围为:缺血再灌注对照组(43.2±1.0%);氨基脲处理组(27.7±1.2%);缺血预适应组(29.3±2.2%);缺血预适应+氨基脲处理组(13.9±3.2%);缺血后适应组(33.6±1.9%);缺血后适应+氨基脲处理组(41.1±4.2%)。与缺血再灌注对照组相比,除了缺血后适应+氨基脲处理组没有统计学差异外,其他组均有统计学差异。(2)各组血浆肌酸激酶活力(U/ml)为:缺血再灌注对照组(2.83±0.33);氨基脲处理组(2.64±0.26);缺血预适应组(2.22±0.25);缺血预适应+氨基脲处理组(2.51±0.32);缺血后适应组(2.28±0.40);缺血后适应+氨基脲处理组(2.61±0.26);假手术组(2.26±0.40);假手术+氨基脲处理组(2.28±0.28)。各组之间没有统计学差异。(3)各组血浆丙二醛水平(nmol/ml)为:缺血再灌注对照组(2.58±0.14);氨基脲处理组(1.74±0.16);缺血预适应组(2.13±0.15);缺血预适应+氨基脲处理组(1.78±0.06);缺血后适应组(2.47±0.21);缺血后适应+氨基脲处理组(1.77±0.17);假手术组(2.11±0.12);假手术+氨基脲处理组(1.66±0.10)。与缺血再灌注对照组相比,所有氨基脲处理组血浆丙二醛水平都显著降低了;与缺血后适应组相比,所有氨基脲处理组血浆丙二醛水平也显著降低。(4)各组血浆髓过氧化物酶活性(U/L)为:缺血再灌注对照组(27.53±2.93);氨基脲处理组(14.16±1.78);缺血预适应组(14.16±1.85);缺血预适应+氨基脲处理组(13.37±1.49);缺血后适应组(13.57±2.56);缺血后适应+氨基脲处理组(12.39±1.63);假手术组(13.18±2.23);假手术+氨基脲处理组(17.90±2.61)。与缺血再灌注对照组相比,其他组血浆髓过氧化物酶活性都显著降低。(5)各组血浆羟自由基水平(U/ml)为:缺血再灌注对照组(628.4±15.7);氨基脲处理组(502.6±27.8);缺血预适应组(509.6±29.9);缺血预适应+氨基脲处理组(505.4±26.9);缺血后适应组(526.6±16.8);缺血后适应+氨基脲处理组(496.9±32.6);假手术组(502.8±25.7);假手术+氨基脲处理组(525.7±29.8)。与缺血再灌注对照组相比,其他组血浆羟自由基水平都显著降低。(6)HE染色结果表明抑制SSAO酶活性显著减少了白细胞的聚集。总之,我们的研究表明抑制SSAO酶可以缓解心肌缺血再灌注损伤。