该课题以非小细胞肺腺癌细胞株A549的凋亡为研究对象,应用<32>P对其进行内照射,顺铂进行化疗.通过细胞计数,MTT法计数、流式细胞仪、透射电镜及免疫细胞化学检测等方法,就辐射后A549细胞的活力改变、细胞凋亡率、细胞超微结构改变及相关基因表达进行了探讨.主要内容及结果如下:一、经放射性核素的细胞代谢排斥实验证实,应用稳定性同位素(无菌PBS磷酸缓冲液)作放射性核素的载体,可以竞争性抑制放射性核素<32>P掺入到细胞内参与代谢,可以用这种方法来模拟细胞所受近距离照射.二、顺铂及<32>P对A549细胞株的存活率及细胞凋亡率的影响.探讨A549细胞株在接受β-射线放射性核素<32>P照射以及化疗药物顺铂作用时,以台盆蓝排斥实验、MTT法观察其量效关系.该实验应用了<32>P进行不同剂量的内辐射,不同剂量的顺铂以及二者联合作用进行研究.三、联合应用对A549细胞株凋亡相关基因表达及细胞超微结构改变的影响.为了进一步了解A549细胞凋亡发生的分子生物学机制,应用免疫组织化学法检测P53,bcl-2,bax基因辐射前后的表达,以及通过透射电子显微镜观察细胞超微结构的改变和细胞凋亡的形态特征.