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盆腔器官脱垂(pelvic organ prolapse,POP)是严重影响中老年妇女生活质量的一种常见病。目前POP的发病机制尚不完全清楚,神经生理学和病理学研究表明,POP患者存在支配盆底组织的神经损伤[1]。神经丝蛋白(neurofilament protein,NFP)是神经元特异性结构蛋白和细胞骨架的主要成分,神经元的结构及功能很大程度上取决于神经丝蛋白的分布及结构变化[2],这一成分的分布及结构发生改变都可能引起盆底结缔组织的神经发生退行性改变,致盆底组织的神经调节异常,组织抗张能力下降,对盆底支撑作用减弱,导致盆腔脏器脱垂。
目的:
本课题通过检测子宫主韧带及阴道前壁组织中神经丝蛋白的表达情况,探讨神经丝蛋白表达异常与POP发生发展的相关性。
材料与方法:
一、材料
50例POP患者的子宫主韧带、膨出阴道前壁组织及10例非脱垂患者的子宫主韧带及阴道前壁组织来自2008年11月至2010年11月间中国医科大学附属盛京医院妇科手术切除的组织。所有组织均经福尔马林固定,常规石蜡包埋。
二、主要试剂
神经丝蛋白鼠抗人单克隆抗体购自福州迈新生物技术开发有限公司,二氨基联苯胺(DAB)显色剂及S-P试剂盒购自沈阳市方丹检验试剂经销有限公司。
三、方法
免疫组织化学染色
过氧化物酶(S-P)法行免疫组织化学染色。切片常规脱蜡至水,高温高压进行抗原修复,一抗4℃孵育过夜,DAB染色,苏木素复染。用PBS代替一抗作为阴性对照。判定标准参照[4]。结果判定:神经丛着色为棕黄色为阳性表达。评分标准:0,不着色;1,淡黄色染色,NFP分布稀疏;2,棕黄色染色,NFP分布较密集;3,棕褐色染色,NFP分布密集呈网状。0-1:为神经丝蛋白阴性表达;2-3:为神经丝蛋白阳性表达。
四、统计学分析
应用SPSS13.0统计分析软件,神经丝蛋白表达和POP临床病理特征的关系用卡方检验,P<0.05为有统计学意义。
结果:
神经丝蛋白表达于神经丛,在POP组患者子宫主韧带及阴道前壁组织中神经丝蛋白表达水平分别为32.0%、28.0%,而在非脱垂组阳性表达水平分别为80.0%、70.0%。二者相比有显著性差异(P=0.005、0.011)。统计学分析表明,POP-Q分度(ⅡvsⅢ+Ⅳ,P=0.016、0.015)子宫主韧带及阴道前壁组织中神经丝蛋白阳性表达率明显下降,而神经丝蛋白表达在患者绝经状态(P=0.643、0.837)及阴道分娩次数(P=0.710、0.368)中差异无统计学意义。
结论:
神经丝蛋白在POP患者子宫主韧带及阴道前壁组织中表达下降,并与脱垂程度相关,说明神经丝蛋白可能是导致POP的发生发展的重要环节。