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蜘蛛香Valeriana jatamansi Jones为败酱科缬草属植物,其药用部位为干燥根茎及根,是云南等西南地区少数民族常用的传统草药,具有理气止痛,消食止泻,祛风除湿,镇惊安神的功效,用于脘腹胀痛,食积不化,腹泻痢疾。课题组前期实验研究表明,蜘蛛香环烯醚萜类成分对肠易激综合征(IBS)模型大鼠有治疗作用,其作用机制与脑-肠轴相关。研究目的：为了进一步研究环烯醚萜类成分的组成,为开发有效组分的五类新药做准备,在前期环烯醚萜类成分提取纯化工艺的基础上,本论文以蜘蛛香大孔树脂洗脱物为研究对象,进行化学成分分离、对环烯醚萜类成分的含量测定方法、稳定性以及代表性成分的急性毒性试验研究,为从民族医药中开发安全、有效、稳定的IBS治疗药物打下物质基础。研究方法：1.以乙醇为提取溶剂,通过加热回流提取得到提取液,通过AB-8型的大孔吸附树脂纯化,得到蜘蛛香的大孔树脂洗脱物干膏。采用硅胶柱层析、葡聚糖凝胶等色谱技术对蜘蛛香大孔树脂洗脱物中的化学成分进行分离纯化,以核磁共振对化合物的结构进行解析。2.采用高效液相色谱法,以11-Ethoxyviburtinal、Baldrinal、11-Methoxyviburtinal、Desacylbaldrinal为对照品,建立了HPLC同时测定蜘蛛香大孔树脂洗脱物中4种环烯醚萜类成分的含量的方法,并对12个产地的蜘蛛香大孔树脂洗脱物中4种成分的含量进行了测定。3.对蜘蛛香11-Ethoxyviburtinal、Baldrinal、11-Methoxyviburtinal、 Desacylbaldrinal成分在高温、高湿下的稳定性进行了研究。4.对11-Ethoxyviburtinal和Baldrinal进行了急性毒性试验,ICR雌雄小鼠各半分别按最大给药量给药。研究结果：1.蜘蛛香大孔树脂洗脱物化学成分研究,结果共分离鉴定出7个成分,分别为：8-acetoxyl-patchouli alcohol、8-hydroxyl-patchouli alcohol、atamaninA、11-Ethoxyviburtinal、Baldrinal、11-Methoxyviburtinal、Desacylbaldrinal。其中11-Ethoxyviburtinal、Baldrinal、11-Methoxyviburtinal、Desacylbaldrinal为环烯醚萜类成分,8-hydroxyl-patchouli alcohol为首次从蜘蛛香中分离得到。2.建立了HPLC测定蜘蛛香大孔树脂洗脱物中4种环烯醚萜类成分含量的方法,结果表明,HPLC含量检测方法稳定可靠,4种环烯醚萜类成分的总量以云南永平的含量最高。3.蜘蛛香中4种环烯醚萜类成分的稳定性影响因素研究,结果表明4种成分在高温、高湿下较为稳定。4.蜘蛛香中环烯醚萜类成分的急性毒性研究,11-Ethoxyviburtinal和Baldrinal组与对照组比较未出现死亡和明显的中毒情况。计算最大耐受量倍数可得,11-Ethoxyviburtinal的剂量相当于临床成人日用剂量的456.6倍,Baldrinal的剂量相当于临床成人日用剂量的1183.9倍,结果表明蜘蛛香环烯醚萜类成分11-Ethoxyviburtinal和Baldrinal在常用剂量范围内是安全无毒的。研究结论：蜘蛛香中含有丰富的环烯醚萜类成分,通过有效的提取纯化方法,可以得到含量较大、成分稳定的原料药,这对于新药的研发具有较大的意义,是药学研究的基础。本论文首次采用了高效液相法建立了测定蜘蛛香大孔树脂洗脱物中的4种同为缬草三酯类降解产物的环烯醚萜成分11-Ethoxyviburtinal、Baldrinal、11-Methoxyviburtinal、 Desacylbaldrinal的含量方法,为蜘蛛香药材质量控制及工艺优化提供测定指标。并通过该方法,对4种成分在高温和高湿的的环境下的含量变化进行了研究,表明了4种单体成分的稳定性。首次对蜘蛛香中的单体成分11-Ethoxyviburtinal和Baldrinal进行了小鼠的急毒试验,实验结果表明这两个成分在剂量范围内安全无毒,说明蜘蛛香环烯醚萜类成分稳定,安全,适宜用于新药开发。