前言 人类头颈部肿瘤中，鼻腔鼻窦肿瘤比较多发，组织形态上以内翻性乳头状瘤、鳞状细胞癌较为常见。目前，鼻腔鼻窦肿瘤，尤其是恶性肿瘤的发病机理尚不十分明确。 人乳头状瘤病毒(human papilloma virus，HPV)是一类环状双链DNA病毒，常常感染皮肤与粘膜上皮引起增生性病变。目前明确HPV分低危型和高危型两类，低危型为HPV6，11型等，高危型为HPV16、18、33型等，高危型HPV与人类肿瘤恶性转化关系密切。在过去10余年中，各方报道了鼻内翻乳头状瘤的HPV病因学研究，从19～76％的鼻内翻乳头状瘤病例中检测出HPVDNA片段，提示HPV感染和鼻内翻乳头状瘤的发生过程可能有关，且HPV11，16的感染可能与鼻内翻乳头状瘤的发生、发展及癌变有关。p53基因是一种肿瘤抑制基因，也是与人类多种恶性肿瘤发生发展关系最密切的基因之一。p53基因突变导致p53功能丧失，有癌变倾向的细胞将以无限增殖方式生存下去，其突变型产物p53蛋白则沉积在细胞内。目前关于p53基因与鼻腔鼻窦肿瘤关系的研究甚少。 本研究用免疫组织化学方法，对58例鼻腔鼻窦肿瘤和10例副鼻窦炎性粘膜组织标本进行了HPV16和p53蛋白检测，初步探讨HPV16感染和p53基因突变在国人鼻腔鼻窦肿瘤发生过程中的作用。 材料与方法 采用1996－2000年中国医科大学附属第一临床学院耳鼻喉科住院病人存档的组织蜡块，鼻腔鼻窦恶性肿瘤25例，内翻性乳头状瘤伴鳞状上皮不典型增生（癌前病变万例，内翻性乳头状瘤24例，炎性粘膜（正常对照人0例，术前均未行放疗或化疗。 上述石蜡包埋的组织标本常规切片脱蜡后，采用免疫组化方法（H步法）进行 P53蛋白染色。热修复抗原，3％Hp。液灭活内源性酶后，使用 A试剂（鼠抗人 P53蛋白单克隆抗体）和 B试剂（羊抗鼠 IgG生物复合剂厂DAB显色后复染，封片。PBS液代替A试剂作空白对照，试剂盒内提供的切片作阳性对照。光学显微镜下观察，P53蛋白表达阳性是细胞核内有棕黄色颗粒沉着。同法使用A试剂（鼠抗HPV16单克隆抗体）和B试剂（羊抗鼠IgG生物复合剂）进行HPV16抗原染色。HPV16抗原阳性是细胞浆内有棕黄色颗粒沉着。 结 果 炎性粘膜和内翻乳头状瘤中无P53蛋白阳性反应。恶性肿瘤和内翻乳头状瘤伴鳞状上皮不典型增生的p53蛋白表达阳性率分别为56．0阮O4人5）和M．5阮k万八二组间无显著差异（P＞0．05X对比前两者差异显著（均P＜0．01人恶性肿瘤中不同性别。吸烟嗜好及发病类型的P53蛋白表达阳性率无统计学差异，均P＞0．05。14例鳞癌中高、中、低分化三组间的 P53蛋白表达阳性率差异无显著性口＞0．05人 内翻乳头状瘤和内翻乳头状瘤伴鳞状上皮不典型增生的HPV16感染率分别为 62．5％（15o4）和 66．7防（6／9），高于恶性 ·2·月瘤的24．0啪（6／25），差异显著（分别P＜0．01，P＜0．05），前二组间的＊＊W6感染率无显著性差异u＞0．05太炎性粘膜中无HPV16感染。 p53蛋白和 HPV16同时阳性者在内翻乳头状瘤伴鳞状上皮不典型增生中占33．3％门乃厂明显高于恶性肿瘤难．0％）和内翻性乳头状瘤N例人 讨 论 鼻腔鼻窦肿瘤的发病过程十分复杂，其确切机制尚不明确。目前，人类乳头状瘤病毒（HPV）与P53基因及其产物P53蛋白的研究是肿瘤研究领域中的热点，二者在人类上呼吸道肿瘤中均具有较高表达。 一、HPV感染与鼻腔鼻窦肿瘤的关系 人类乳头状瘤病毒是一双链DNA病毒，其主要蛋白E6、E7与病毒细胞转化功能及致癌性有关。HPV只感染人的皮肤和粘膜上皮细胞，大多数位于良性病变中，但恶性肿瘤中也已有发现。迄今，发现有90余种HPV亚型，明确HPV16，18，33等型为高危型，HPV6，11等型为低危型。低危型 HPV6，11的感染具有一定自限性，在体内可以自行消失，但高危型HPV16，18型会持续存在，最终导致上皮细胞的恶性转化。另外，HPV16，18型病毒基因组整合人宿主细胞后可以表达如 E6、E7肿瘤蛋白等，这些肿瘤蛋白极易与P53蛋白、他蛋白结合，中和二者抑制细胞生长的功能。所以高危型HPV感染后可能存在潜在的致癌危险性。 过去10余年的研究结果提示HPV感染和鼻内翻乳头状瘤的发生过程可能有关，然而关于鼻腔鼻窦恶性肿瘤与HPV感染相关性的研究国内外报道较少。本实验用免疫组化方法对25例鼻腔鼻窦恶性肿瘤，24例内翻乳头状瘤及9例内翻乳头状瘤伴鳞状上 ·3·皮不典型增生，10例炎性粘膜组织标本进行了HPV16结构抗原的检测，结果内翻乳头状瘤和内翻乳头状瘤伴鳞状上皮不典型增生的 HPV感染率分别达 62．5％和 66．7％，表明 HPV可能是乳头状瘤的主要致病因素。两组的HPV16感染率无统计学差异，提示高危型HPV对内翻乳头状瘤的恶性转化过程可能无直接诱导作用，还需要与宿主细胞癌基因激活、抑癌基因失活协同发挥作用。恶性肿?