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目的:系统性地研究中国人B-NHL常见类型中BCL-6基因的异常,并探讨其临床病理意义。方法:对135例中国人常见类型的B-NHL和对照组5例T-NHL、5例结节型淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤(Nodular lymphocyte predominance Hodgkin’s lymphoma,NLPHL)以及10例淋巴结反应性增生(Lymphoid reactive hyperplasia,LRH)石蜡包埋组织进行形态学观察和BCL-6、CD10以及BCL-2等抗体的免疫组织化学染色;应用PCR扩增及DNA直接测序方法检测上述全部样本中BCL-6基因5’-非编码区突变,以看家基因β-Actin作为内对照检测DNA质量;应用断裂分离探针间期核FISH技术检测其中22例结内DLBCL石蜡组织、10例结内DLBCL新鲜组织和5例LRH中BCL-6基因的重排。结果:(1)BCL-6和CD10阳性表达均只见于LRH、结内DLBCL、结外DLBCL、FL以及BL,阳性率分别为:100%(10/10)和100%(10/10)、72.7%(16/22)和40.9%(9/22)、75.9%(22/29)和41.4%(12/29)、88.9%(16/18)和72.2%(13/18)以及100%(5/5)和100%(5/5)。其余B-NHL如B-SLL、MCL、MALT-L、LPL、LBL以及T-NHL和NLPHL中均未见BCL-6和CD10蛋白的表达。BCL-2蛋白表达只见于结内DLBCL、结外DLBCL、 FL、 B-SLL、MCL、MALT-L以及 LBL,阳性率分别为:36.4%(8/22)、27.6%(8/29)、83.3%(15/18)、88.9%(16/18)、86.7%(13/15)、72.7%(13/18)和33.3%(1/3);而LPL、BL、T-NHL以及NLPHL均未见BCL-2蛋白表达。(2)DLBCL中BCL-6的表达形式可以分为四种类型:GC/FL型、中间型、散在型和阴性型;40.9%(9/22)的结内DLBCL、41.4%(12/29)的结外DLBCL、72.2%(13/18)的FL以及100%(5/5)的BL为BCL-6+/CD10+表达,其中BCL-6蛋白表达均为GC/FL型。在临床特征上,BCL-6+/CD10+的淋巴瘤与非BCL-6+/CD10+的淋巴瘤相比,前者的临床分期好于后者(p<0.05)。(3)135例B-NHL中BCL-6突变率为14.8%(20/135),<WP=7>突变仅见于结内DLBCL、FL、MALT-L和结外DLBCL中,突变率分别为:27.3%、22.2%、22.2%和20.7%。B-SLL、MCL、LPL、BL、LBL、T-NHL以及NLPHL中均未见BCL-6突变。1例(10%)LRH的生发中心细胞可见有BCL-6突变。结内和结外DLBCL中BCL-6突变率无显著性差异(p>0.05)。突变频率为0.14×10-2 /bp~0.68×10-2 /bp;突变类型全部为碱基替换点突变。发生BCL-6基因突变的DLBCL中血清LDH高于正常值(p<0.05)。(4)结内DLBCL样本中BCL-6基因重排阳性率为28.1%(9/32),其中DLBCL石蜡组织样本中BCL-6基因重排阳性率为27.3%(6/22);DLBCL新鲜组织样本中BCL-6基因重排阳性率为30%(3/10),二者间无显著性差异(p>0.05)。5例LRH样本中均未检测到BCL-6基因重排,阳性率为0%,与DLBCL相比,有统计学显著性差异(p<0.05)。BCL-6基因重排与其蛋白表达、5’-非编码区突变以及临床特征之间均无显著相关性(p>0.05)。结论:(1)在中国人B-NHL常见类型中,BCL-6和CD10蛋白主要表达于DLBCL、FL和BL,联合检测BCL-6与CD10的蛋白表达,可能更有助于对DLBCL、FL和BL,特别是真正GC-B细胞起源的DLBCL的诊断。(2)BCL-6的表达形式可以分为四种:GC/FL型、中间型、散在型和阴性型,在BCL-6+/CD10+的淋巴瘤中,其BCL-6的表达形式均为GC/FL型,可能具有更好的临床预后。(3)BCL-6、CD10和BCL-2蛋白的联合检测,可以用于FL、MCL、MALT-L、B-SLL等部分B-NHL的鉴别诊断。(4)中国人B-NHL中BCL-6突变率为14.8%,低于国外文献报道。突变仅见于结内DLBCL、FL、MALT-L和结外DLBCL中,提示BCL-6基因突变可能只在一定程度上参与中国人B-NHL的发生和发展。(5)BCL-6基因突变频率为0.14×10-2 /bp~0.68×10-2 /bp;突变类型全部为碱基替换点突变。(6)应用间期核FISH技术可以检测新鲜或石蜡淋巴瘤组织样本中BCL-6基因的重排。(7)中国人结内DLBCL样本中BCL-6基因的重排阳性率为28.1%; LRH样本中均未检测到BCL-6基因重排,提示BCL-6基因重排可能参与了中国人结内DLBCL的发生。