栀子西红花苷和环烯醚萜苷药理活性及药代动力学研究

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目的:研究栀子中西红花苷与gardecin抗氧化活性;研究栀子西红花苷、环烯醚萜苷和西红花抗非酒精性脂肪肝药理活性;研究西红花苷-1在大鼠体内药物代谢动力学和各个器官组织分布,为阐明西红花苷-1在体内各器官发挥药理活性提供依据。方法:(1)采用·OH自由基清除能力、还原能力、Fe2+螯合能力和亚硝酸盐抑制能力实验测定西红花苷与gardecin抗氧化活性。(2)C57BL/6雄性小鼠64只,随机分为8组,每组8只,即:MCS组、MCD组、TCG-H组(100mg/kg)、TCG-L组(50mg/kg)、TIG-H组(100mg/kg)、TIG-L(50mg/kg)、SEA-H组(25mg/kg)和SEA-L(12.5mg/kg)。采用MCS或MCD饲料喂养小鼠并以上述剂量灌胃。通过肝指数观察小鼠肝重和体重变化,通过肝脏外观、HE、天狼星红和MASSON染色观察小鼠肝脏形态学变化,ELISA法测定小鼠血清TG、TC、ALT和AST含量。(3)雄性SD大鼠10只,随机分成对照组和给药组,每组5只。大鼠禁食12h后,给药组以含西红花苷-1(300mg/kg)生理盐水溶液灌胃,然后在不同时间点采血和处死,取心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏。血浆和组织匀浆样品经处理后,LC-MS分析。结果:(1)在以上4个抗氧化能力测定实验中,gardecin抗氧化活性均强于西红花苷。(2)肝指数结果显示,与MCS组比较,MCD组肝指数显著下降;与MCD组比较,各给药组肝指数相对正常(P<0.05)。肝脏外观和3种染色结果显示,与MCS组比较,MCD组肝脏发生病变,电镜下能观察到脂肪空泡和纤维化;与MCD组比较,各给药组肝脏病变显著缓解,脂肪空泡和纤维化显著减少。生化指标结果显示,与MCS组比较,MCD组TG和TC水平显著降低(P<0.05),ALT和AST水平显著升高(P<0.05)。与MCD组比较,各给药组TG和TC水平升高(P<0.05),ALT和AST水平降低(P<0.05),且高剂量组比低剂量组变化更显著(P<0.05)。(3)LC-MS检测结果显示,口服西红花苷-1后,在血液、心、肝、脾、肺和肾都发现西红花苷-1与其3种代谢产物,西红花苷-1在心、肝、脾、肺和肾中相对含量达峰时间分别为2h、1h、2h、2h和2h;西红花酸则分别为4h、1h、0.5h、1h和2h;西红花酸单葡萄糖醛酸则分别为1h、4h、2h、2h和6h;西红花酸双葡萄糖醛酸则分别为1h、0.5h、2h、1h和1h。结论:(1)西红花苷结构中糖基团有利于抗氧化活性发挥,而gardecin抗氧化活性比西红花苷强,与其结构中的羰基有关。(2)栀子总西红花苷、总环烯醚萜苷和西红花提取物对小鼠NAFLD具有显著治疗效果。(3)西红花苷-1口服后,在胃肠道被水解和吸收,在肝脏被葡萄糖醛酸化后进入全身血液循环,分布到心、肝、脾、肺和肾等以上器官。
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