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胆碱是反刍动物机体必需的重要营养物质,其参与体内多种代谢过程。胆碱对奶牛生理性能的调控发挥着重要作用,如提高乳品质、促进脂质合成、预防脂肪肝、调控能量负平衡等,但是目前胆碱对反当动物肉用性能的研究较少且结果不尽一致。探索反当动物日粮中胆碱的适宜添加量,对其生长性能、饲料利用率及代谢性能的影响具有重要研究意义。本研究以过瘤胃保护胆碱(Rumen protected choline chloride,RPC)作为营养调控因子,借助生长试验、消化代谢试验以及奶牛肝细胞体外培养试验,研究胆碱对湖羊育肥阶段的生长性能、消化性能及肝细胞脂肪代谢和抗氧化能力的调控作用。全文分4个章节进行阐述。试验一、RPC对湖羊生长性能、采食量及料重比的影响试验采用40只日龄相近、体重15 kg左右的湖羊公羔(已做正常免疫程序)开展试验,随机分为4组(每组10只,组间体重差异不显著(P>0.05)),分别为A组(对照组)、B组(0.1%RPC添加组)、C组(0.2%RPC添加组)和D组(0.4%RPC添加组),试验期为60天(20天为1个阶段),试验结果如下:0-20 d阶段,添加RPC对湖羊日采食量及料重比无显著影响(P>0.05);对日增重有提高效果,0.1%RPC组达到显著水平(P<0.05)。20-40 d阶段,添加RPC能够提高湖羊日采食量、日增重,降低料重比,0.1%RPC效果显著(P<0.05)。40-60 d阶段,RPC对湖羊料重比、日增重未产生显著影响(P>0.05);对湖羊日采食量具有显著提高效果(P<0.05)。全程0-60d,添加RPC对湖羊日采食量有提高作用,0.1%RPC组存在显著差异(P<0.05);添加RPC显著提高湖羊日增重(P<0.05);添加RPC的湖羊料重比有所下降(P>0.05);添加RPC对湖羊体长、体高及管围无显著影响(P>0.05),但显著提高了胸围尺寸(P<0.05)。RPC主要通过刺激肉羊对饲粮的摄取,提高对饲料的利用率,增加肉羊胸围尺寸,整体提高肉羊的生长性能。试验二、RPC对湖羊消化代谢功能的影响饲养试验结束后,立即开展消化代谢试验,试验设计及基础日粮同于试验一,试验期为5天,每天定时收集每只羊的粪便(10%盐酸固氮),测定不同RPC添加水平对湖羊日粮表观消化率的影响。分别对粪样及饲粮的干物质(DM)、有机物(OM)、粗蛋白(CP)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、钙及磷进行试验室常规检测,外源指示剂法测定表观消化率,结果表明:添加RPC对湖羊OM表观消化率的效果不显著(P>0.05);0.1%和0.2%RPC组对DM及CP表观消化率未产生显著影响,0.4%RPC组DM及CP的表观消化率显著提高(P<0.05);随着RPC水平的增加,NDF、ADF的表观消化率均略有提高,但NDF未达到显著差异性(P>0.05),ADF差异性显著(P<0.05);随着RPC添加水平的提高,湖羊对钙的表观消化率呈上升趋势,0.4%RPC的作用效果显著高于对照组和其他试验组(P<0.05);试验组较对照组,磷的表观消化率显著提高。RPC主要通过促进肉羊对DM、OM、CP、NDF、ADF、钙及磷的消化吸收,整体提高对饲粮的利用率,但对营养物质的利用效果跟RPC添加水平有一定关系。试验三、胆碱对奶牛肝细胞代谢和抗氧化功能的影响本试验以奶牛肝脏原代细胞(源于南京农业大学沈向真教授提供的奶牛肝脏原代细胞系)为研究对象,分别作5种处理:A组:PBS组;B组:添加0.128 mM氯化胆碱;C组:添加0.256 mM氯化胆碱;D组:添加1.024 mM氯化胆碱和E组:添加4.096 mM氯化胆碱。细胞培养成熟后,经RNA的提取、反转与定量检测,试验结果如下:0.128 mM,0.256 mM,1.024 mM水平的胆碱处理奶牛肝脏细胞可显著降低其FASN基因表达(P<0.05),而4.096 mM处理组表达差异不显著;不同浓度胆碱处理后奶牛肝脏细胞中的ACCα呈下降趋势,而PPARγ表达呈上升趋势,均未达到显著水平;胆碱处理后奶牛肝脏细胞中的LPL表达水平显著升高(P<0.05),但不同胆碱浓度水平间没有显著差异。胆碱处理后奶牛肝脏细胞中SOD1的表达无显著差异;只有当添加的胆碱到达4.096 mM时,奶牛肝脏细胞中的 SOD2 表达显著升高(P<0.05);0.256 mM、1.024 mM 和 4.096 mM 胆碱处理后,奶牛肝脏细胞中的SOD3表达与对照组相比显著升高(P<0.05);奶牛肝脏细胞中的GPX1基因表达在胆碱处理后虽略有升高,但未达到显著水平;不同浓度胆碱处理后,奶牛肝脏细胞中的GPX表达显著升高;胆碱处理后奶牛肝脏细胞中CAT表达无显著差异。综上所诉,在奶牛肝脏细胞中添加胆碱能够抑制细胞中脂肪酸合成,促进脂肪酸代谢,并且能够通过提高细胞的抗氧化功能,抑制炎症基因的表达。