NALP3炎性体在食管鳞癌的表达及IL-1β对ESC410细胞株作用的研究

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第一部分:NALP3炎性体及相关炎性因子在人食管鳞癌中的表达目的:通过检测人食管鳞癌组织与正常食管组织NALP3(NACHTLRR-PYD-containing proteins 3)炎性体各组成部分:NALP3受体蛋白、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis associated speck-like protein containing a card ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)及其相关炎性因子IL-1β、TNF-α表达差异,了解食管鳞癌与NALP3炎性体及相关炎性因子关系。材料与方法:酶联免疫吸附试验(Elisa法)对人食管鳞癌组织和食管正常组织各20例中IL-1β及TNF-α表达进行检测,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测人食管肿瘤组织和正常组织NALP3炎性体各组分mRNA表达,使用western-blot法检测人食管鳞癌组织和食管正常组织中NALP3炎性体蛋白的表达。结果:IL-1β在肿瘤组织及切缘正常组织中表达量分别为:[(3.84±0.78)pg/ml]和[(0.27±0.04)pg/ml](P<0.01),TNF-α在肿瘤组织及切缘正常组织中表达量分别为:[(1.07±0.13)pg/ml]和[(0.40±0.06)pg/ml](P<0.05)。NALP3蛋白在肿瘤组织及切缘正常组织中表达量分别为:(1.48±0.04)和(1.09±0.08),(P<0.05),CASP-1蛋白在肿瘤组织及切缘正常组织中表达量分别为:(0.59±0.03)和(0.36±0.04),(P<0.01),ASC蛋白在肿瘤组织及切缘正常组织中表达量分别为(0.42±0.10)和(0.18±0.08),(P<0.05)。NALP3mRNA在肿瘤组织及切缘正常组织表达量分别为:(1.06±0.14)和(0.89±0.12),(p<0.01),casp-1mrna在肿瘤组织及切缘正常组织表达量分别为:(0.93±0.09)和(0.80±0.12),(p<0.05),ascmrna在肿瘤组织及切缘正常组织表达量分别为:(0.98±0.08)和(0.85±0.15),(p<0.05)。结论:nalp3炎性体组分:nalp3受体蛋白(nalp3);半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1);凋亡相关的斑点样蛋白(asc)及相关炎症因子il-1β、tnf-α在人食管鳞癌组织的表达均高于正常组织。第二部分:il-1β对食管鳞癌细胞株esc410增殖及迁移能力的影响目的:通过以不同浓度il-1β刺激四川食管癌高发区的人食管癌鳞状上皮细胞株(esc-410),探索il-1β对esc410细胞株迁移和增殖能力的影响。材料和方法:不同浓度il-1β(0ng/ml、1ng/ml、10ng/ml)刺激esc410细胞株,在刺激24h后采用edu(5-溴-2脱氧尿嘧啶)法检测细胞增殖变化,刺激12h及24h后划痕实验测定细胞迁移能力变化。结果:1ng/ml刺激组及未刺激组细胞增殖比例分别为:[(42.6±1.0)%]和[(37.8±2.3)%],(p<0.01)。10ng/ml刺激组及未刺激组细胞增殖比例分别为:[(38.9±1.4)%]和[(37.8±2.3)%],(p>0.05)。经1ng/ml浓度il-1β刺激12小时及24小时后细胞迁移距离(fx)与同时间未刺激组迁移距离分别为[12h,(219.1±13.8)和(121.4±12.0)](p<0.01);[24h,(416.5±21.3)和(192.7±16.8)](p<0.01)。经10ng/ml浓度il-1β刺激12小时及24小时后细胞迁移距离(fx)与同时间未刺激组迁移距离分别为[12h,(135.5±35.2)和(121.4±12.0)](p>0.05);[24h,(200.9±18.5)和(192.7±16.8)](p>0.05)。结论:1ng/ml浓度的il-1β可明显增加esc410细胞珠的增殖及迁移能力,但当其浓度升高至10ng/ml时,上述作用消失。
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