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该文以Tet-on-LMP1 HNE2鼻咽癌细胞为动态研究模型,以间接免疫荧光法联合激光共聚焦荧光显微镜技术、Western Blot印迹法、免疫共沉淀-Western印迹法、染色质免疫共沉淀-PCR、点突变技术、荧光酶基因报道系统、EMSA和SuperShift法及流式细胞分析与分选术等为主要技术,结合信号转导中诱导及阻断策略,取得如下重要的创新性发现:1.首次发现LMP1可同时上调EGFR蛋白和功能性磷酸化水平,并呈剂量依赖效应.LMP1反义寡核酸可部分有效地阻断EGFR的磷酸化水平,而EGFR显性突变体可完全阻断其磷酸化.2.首次发现LMP1可反式激活EGFR启动子活性,并在一定程度上呈正相关效应,EGFR显性负性突变体和LMP1 Antisense可阻断LMP1反式激活EGFR启动子的作用; LMP1主要通过其CTAR1上调EGFR启动子活性,而CTAR2则起部分的作用;LMP1主要通过其CTAR1活化NFκB信号通路上调EGFR启动子活性,LMP1所激活的AP-1信号通路也参与其中的反式激活作用,但以NFκB信号通路为主;通过生物信息学发现EGFR启动子存在两个NFκB,进一步证实LMP1反式激活EGFR启动子活性为NFκB所依赖.3.首次发现LMP1可调控EGFR的核移位,并呈一定的剂量效应,并且发现EGFR的核定位信号在其核移位过程中起着一定的作用,并初步证实LMP1调控EGFR核移位为配体非依赖性,同时还发现LMP1调控EGFR核移位可能与NFκB信号通路有关.4.在LMP1的调控下,首次发现核内EGFR可直接调节与G1/S期重要的调节因子cyclinD1和cyclinE,通过影响细胞周期各期调节分子,导致更多的G0期进入细胞周期,由G1期进入S期细胞增加.在LMP1调控下,首次发现转录因子EGFR进一步加速细胞周期演进,特别是G1/S转换进一步加强.进一步发现在LMP1调控下,EGFR明显影响细胞周期G1/S期重要调节因子,并且不同EGFR突变体对进一步加速细胞周期演进的作用机制也不尽相同.通过该研究将信号转导和细胞周期这两个当前最活跃的研究领域交叉起来,为阐明LMP1的分子致瘤机制提供了进一步的实验依据,同时为EB病毒致瘤分子机理研究开拓一个新的视野,为抗信号转导治疗肿瘤提供新的科学依据,从而为在癌变早期同时干预信号转导和细胞周期调控失常的相关靶基因的治疗建立了一种全新的理论依据.