集胞藻PCC 6803中与乙醇胁迫相关的转运蛋白Slr0982的鉴定分析

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在最近兴起的合成生物学研究中,光合蓝细菌经常被用于构建生产化学品和生物燃料如乙醇的工程菌。然而,其中限制乙醇产量的一个重要因素就是蓝细菌底盘对乙醇耐受性很低。转运蛋白是一种介导离子、小分子或者大分子物质跨膜转运的蛋白质,经常被发现与对外界胁迫的耐受性相关。在本研究中,为了鉴定与乙醇耐受相关的转运蛋白,我们利用同源重组原理对集胞藻PPC 6803中58个编码转运蛋白的基因进行了逐一敲除,通过筛选各突变株在乙醇胁迫下的表型,发现编码ABC转运蛋白基因的突变株△slr0982在含有1.5%(v/v)乙醇的培养基中,与野生株相比生长速率较慢,而互补株?slr0982/pXT-slr0982生长速率几乎与野生株相同,表明集胞藻PPC 6803中的基因slr0982与乙醇耐受相关。为了探索该基因与乙醇耐受相关的机制,利用代谢组学并结合生物信息学分析,对野生株和乙醇敏感株△slr0982进行了研究。通过WGCNA网络分析,我们鉴定出4个与基因slr0982敲除相关的代谢模块,其中包括中心代谢物蔗糖和左旋焦谷氨酸,可能在细胞对抗乙醇毒性过程中起重要作用。本研究第一次在集胞藻PPC 6803中报道与乙醇耐受相关的转运蛋白,这可能为进一步研究溶剂耐受机制提供一个有用的靶点。此外,利用代谢组学结合网络分析的方法为更准确地揭示集胞藻PPC 6803的乙醇耐受机制提供了重要的视点。
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