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背景和目的 肝星状细胞(hepatic stellate cell，HSC)是肝纤维化发生过程中细胞外基质（extracellular matrix ,ECM）形成的主要细胞，HSC的活化增殖受细胞内信号传导通路的调控，是近年来肝纤维化防治研究中的热点。ERK信号传导通路由于参与调控细胞增殖与分化，是多种信号交汇点或共同通路，从而备受关注。业已证实：乙醛作为一种刺激信号可以激活HSC增殖、分泌ECM，是酒精性肝病发生的关键分子。我们的前期研究表明：ERK信号传导通路参与了调控乙醛刺激的HSC活化增殖。但调控的分子机制尚未明了。本实验旨在通过特异性MEK阻断剂PD98059作用于乙醛刺激的HSC后，观察HSC内ERK活性、细胞增殖、细胞周期时相和细胞周期蛋白(Cyclins)表达的变化；初步探讨ERK信号传导通路调控HSC细胞增殖的分子机制；以期为肝纤维化的发生和防治提供理论和实验依据。方法 体外培养大鼠HSC；采用Western blot检测乙醛刺激后HSC内ERK活性的变化和观察不同剂量PD98059(20、50、100μmol/L)对乙醛刺激后HSC内ERK活性的影响；采用MTT比色法和免疫组化法分别检测不同剂量PD98059(20、50、100μmol/L)作用于乙醛刺激的HSC后细胞增殖及增殖细胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen， PCNA）表达的变化；流式细胞仪分析PD98059(20、50、100μmol/L)对乙醛刺激后HSC的细胞周期时相变化；采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及凝胶电泳分析不同剂量PD98059(20、50、100μmol/L) 作用于乙醛刺激的HSC后CyclinD1mRNA表达的变化。结果 (1) HSC被乙醛刺激后,磷酸化ERK(p-ERK)水平增高、PCNA合成及细胞周期蛋白CyclinD1mRNA表达增加、细胞由G1→S期转化增多、促进细胞增殖。与空白对照组比较，统计学分析有显著差异（P<0.05）。(2) 20、50、100μmol/L PD98059 均能抑制乙醛刺激的HSC内p-ERK水<WP=7>平,与对照组比较有显著差异(P<0.05)；20μmol/L PD98059对乙醛刺激的HSC增殖及PCNA合成、CyclinD1mRNA表达的抑制作用与对照组比较无统计学差异(P>0.05)；50、100μmol/L的PD98059可明显抑制乙醛刺激的HSC内PCNA合成及CyclinD1mRNA表达，并明显抑制细胞由G1→S期的转化和细胞增殖，与对照组比较有统计学差异(P<0.05)。结论(1) 乙醛刺激HSC后，引起ERK信号传导通路活化。 (2) 乙醛促进HSC增殖与ERK活化关系密切，并呈剂量依赖性。 (3) 乙醛刺激HSC后,促进HSC由G1期向S期转化，同时PCNA合成及CyclinD1mRNA表达增加。 (4) ERK信号传导通路调控乙醛刺激的HSC增殖可能与其调控HSC内PCNA合成、CyclinD1mRNA表达和细胞周期变化有关。