百合‘普瑞头’组织培养与开放组培初探

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百介‘普瑞头’(Lilium asiatic Hybrids’Prato’)为亚洲百合杂种系,(Asiatic hybrids)的一个栽培品种。花橙红色,无香味,具有很强的抗寒、抗病害能力,在东北地区可露地栽培,是培育抗寒百合新品种的重要杂交亲本。本实验以百合‘普瑞头’鳞片为初代培养的外植体,建立组培体系,提高组培效率;对百合开放组织培养进行了初步探索,以期简化组培过程,降低百合组培成本。1.以百合‘普瑞头’鳞片为外植体,研究激素种类及浓度、鳞片部位、光周期等对鳞片分化的影响。结果表明:0.1%HgC12加入吐温20消毒处理8min为百合最佳消毒方式;诱导小鳞茎最适宜培养基为MS+0.50mg/L6-BA+0.10mg/LNAA,诱导率高达85.0%;鳞片诱导不定芽及愈伤的能力依次为内层>中层>外层,内层鳞片的最适诱导培养基为MS+0.50mg/L6-BA+1.00mg/LNAA,中层鳞片的诱导不定芽的最适培养基为MS+1.00mg/L6-BA+0.10mg/LNAA,平均诱导芽数最高;鳞茎诱导过程中适当的黑暗处理有利于外植体的诱导。适当时间的黑暗处理,鳞片分化的最适培养基为MS+1.00mg/L6-BA和10.10mg/LNAA。2.百合‘普瑞头’再生叶片各部分的分化能力强弱为:叶基>叶中>叶尖,2,4-D浓度相同时,暗培养的叶片的分化率总是高于光培养。光培养及暗培养条件下,再生植株叶片的最适培养基均为MS+0.10mg/L2,4-D。3.百合‘普瑞头’再生小鳞茎鳞叶的分化能力强,无污染,且数量多,因此是‘普瑞头’快速繁体系的首选外植体。MS+1.00mg/L6-BA最适宜培养基,平均生成不定芽数最多,为4.7个,并且不定芽生长健壮;其次为MS+0.50mg/L NAA,平均生成不定芽和根的数量较多,并且植株生长健壮,获得的不定芽可直接用于炼苗移栽。4.诱导愈伤增殖与分化的最适培养基为MS+1.00mg/L6-BA+0.50mg/LNAA;诱导率为100.0%,并且平均生成芽数最多(8.4个);根处愈伤增殖与分化的培养基为MS+0.50mg/L6-BA+1.00mg/LNAA,诱导率最高(76.7%),诱导不定芽数量多且生长健壮。最适不定芽的增值效果最好的是MS+0.50mg/L6-BA+0.05mg/LNAA;最适宜百合生根的培养基为1/2MS+0.50mg/LIBA,生成根的数量多且整齐;室内炼苗后移栽成活率高达85.0%,且移栽后生长良好。5.塑料杯(高锰酸钾消毒)+组培塑料封口膜(高温灭菌)组合的培养基污染率最低,采用高锰酸钾消毒后的塑料杯,污染率明显降低;在上述的培养容器和消毒方法下,代森锰锌的有效抑菌浓度为5mg/L。6.以组织培养的百合‘普端头’再生小鳞茎鳞叶为外植体,建立了‘普瑞头’开放式组培体系。开放组培百合再生植株鳞片分化分化率为100%,和传统组培相同、平均分化芽数为4.4个略低于传统组培,但是相差不大;开放组培不定芽增殖效果于传统组培不定芽增值,诱导率及增殖倍数均高于传统组培;IBA处理60s为最适宜百合微扦插的IB八处理时间,不定芽的生率最高(92.3%)。瓶外生根后的百合组培苗生长健壮,比传统组培苗更快适应外界环境。
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