背景：肥大心脏最终将发展为心力衰竭，而后者又是多种心血管疾病死亡的重要原因。然而，目前仍不清楚心肌肥大发生发展的确切机制。尽管已有多种细胞内信号传递途径涉及到心肌肥大的发生发展，但仍不清楚哪一条信号通路和何种转录因子起着主要作用。 我们以往的研究发现，缺血再灌注大鼠的心肌组织中，NF-κB活性显著增高。由于缺血再灌注所致的心肌损伤和压力负荷的增加是导致心肌肥大的重要因素，我们推测，NF-κB信号途径直接参与到心肌肥大发生发展过程中。为证实我们的推测，我们设计了以下几个方面的实验研究。 目的： 1．阐明在整体条件下，NF-κB信号通路是否在心肌肥大的发病机制中起着关键作用。 2．探讨NF-κB活性变化在PI3K／Akt信号通路激活所诱导的心肌肥大发生发展中的作用。 3．研究同时抑制NF-κB结合活性和PI3K／Akt信号途径对心肌肥大发生发展的影响，了解二者是否存在协同作用，以期为临床用药提供理想靶点。 4．确定TLRs介导的MyD88依赖性NF-κB信号途径在心肌肥大发生发展方面的作用。 方法： Ⅰ．动物模型 1．为阐明在整体条件下，NF-κB信号通路是否在心肌肥大的发病机制中起着关键作用，我们以缩窄SD大鼠升主动脉诱导的心肌肥大为模型，分析了NF-κB的DNA结合活性。此外，我们将腺病毒携带的IκBα突变体(NF-κB 南京医科大学博士学位论文活性的特异，国中制物)转染到心刀醚且织中，或使用抗幸以七剂-H刀℃或NAC，观察了抑制入下~KB活了铆寸，心月朋巴大发生发展的影响。 1为探讨卜下~KB活性变化在PBK/Akt信号通路激活所诱导的心月朋巴大发生发展中的作用，我们以，‘脏特异性持续性激活PI3K俏kt信号的转基因小鼠仲田BK和伪A虹)为模型，检测了这些转基因小翩巴大心肌组织中的卜下~KB活性。同时，我们以咫K/Aki无功能转基因小鼠帅IP13K和k少血)为动物模型，观察了缩窄主动脉后，。助切巴大的发展情况，及心肌组织中的卜下~KB活性。 1为研究同时抑制NF~KB结合活性和PI3刃Akt信号途径对，心月侧巴大发生发展的影响，我们以伪A狱转基因小鼠所诱导的心刀切巴大和缩窄野生型小鼠主动脉诱导的心川胡巴大为模型，研究了同时抑制卜J~KB活性和咫K/Aki信号途径对心月朋巴大发生发展的影响。同时我们亦观察了抑制卜下~KB活性对缩窄无功能PI3K和k少血转基因小鼠主动月永诱导的，心刀胡巴大发生发展的影响。 屯为确定TLF污介导的哑归88依赖性N下~KB信号途径在心川巴大发生发展方面的作用，勿门以缩窄SD大鼠升主动脉诱导的，。刀切巴大为模型，将腺病一翻隽带的无功能M夕眺8(DN‘NlyD88)转染到心月少峪沮织中，以观察阻断M州哟下游信号通路对，心月朋巴大发生发展的影响。为探讨卫J始介导的信号途径在心月朋巴大发生发展中的作用，我们以卫“R斗-/-缺陷小鼠为模型，观察了卫卫4功能缺失对心月朋巴大发生发展的影响。 几观察指标 撰洱绷包浆和月色该蛋白，采用日功SA的方法分析NF一KB结合活性;采用酶活J幽幽则的方法检钡d IRAKI、邓K和水X口激酶的活性;采用贾叮℃R法撼钡弓AN[P和BN[P mRNA的表达;采用认峡九m blot分析Akt、水Xa/口、IKBa、只心女政和GSK3日的磷酸化水平;采用共免疫沥‘定方法检测卫只4与砂口88的交互作用;采用HE染色的方法，了解，心肌细胞形态结构。 结果: 南京医科大学博士学位论文 L缩窄大鼠升主动脉，明显增加心那以织中NF.书B活性 1.缩窄升主动脉后，大鼠，心脏重量/体重比值明显增加，缩窄l周和4周后，与周龄配对的假手术组相比，分别升高了35.8%和53.6%(少刃.01);心刀切巴大的重要标志-A卜IP和BNP mRNA表达水平也明显增高，缩窄1周和3周后，与周龄配对的假手术组相比，AN pl五RNA分别升高了122.0o/d卜2772%，B卜沪mRNA分别升高了 370%和547%。 1升主动脉缩窄1天后，与周龄配对的假手术组相比心肌组织中的入下破B活性增加了167%(少习.01)。在，“月朋巴大的发生发展过程中，卜正火日活性待续增加，在升主动月和缩窄3周达高峰，4周后开始回降，但与对照组相比仍然明显增高;同时服K日活性的增高刀侈宿窄升主动脉的第1天一直持续到缩窄主动脉后的第六周。 1转染Ads一‘B oM能明显地喇氏缩窄升主动脉所增加的，。脏重量琳重比值，与未治疗组相比，下降了n .9%(厂习.01)，同时阳氏卜下~KB结合活性(九乃，水卫aM治疗组与未治疗组相比下降了48名%，少刃.05)和卜水刀。蛋白表达水平。 屯抗氧化剂.班刀℃和NAC处理组与未治疗组相比，其，讼脏重量阵重比值分别喇氏了143%《少刃.01)和11 .5%(p(。.05)，心月少峪且织中NF一KB结合活性也分别喇氏了40.5%和267%。 几N卜‘B参与F6KIA址信号途径诱导的心刃切性大 1.在压力负荷增加诱导的大鼠心月朋巴大模型中，咫K/Aki被激活，心月少醚沮织中邓K活性增加l科%，卜Akt蛋白表三彭曾力口42.5%，Aki蛋白?