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目的:探讨NSCLC细胞中是否存在miR-125a-5p参与调控上皮间质转化过程,从而导致其发生EGFR-TKIs耐药,对miR-125a-5p与上皮间质转化在EGFR-TKIs耐药中的关系进行研究。方法:运用慢病毒感染技术感染耐厄洛替尼的NSCLC细胞株PC9ER,将其分为miR-125a-5p上调组(PC9ER-miR-125a-5p)和miR-125a-5p下调组(PC9ER-sh RNA-miR-125a-5p),镜下观察细胞形态,划痕实验探讨细胞迁移能力,采用Western blot及RT-PCR方法与厄洛替尼敏感的肺腺癌细胞株PC9、耐厄洛替尼的肺腺癌细胞株PC9ER比较各组细胞中EMT标志物(E-cadherin、Vimentin、ZEB1、Snail)在蛋白及m RNA表达情况。结果:1.相较于PC9ER及上调miR-125a-5p的PC9ER细胞,下调miR-125a-5p后,PC9ER细胞形态发生长梭形转变,且细胞大小差异较大;划痕实验发现随着时间推移,下调miR-125a-5p的PC9ER细胞划痕间距明显变窄。2.在E-cadherin m RNA表达水平方面:PC9ER细胞中E-cadherin表达较PC9细胞低(P<0.0001);上调mi R-125后,与PC9ER细胞相比其E-cadherin表达明显增加(P<0.0001);PC9ER-sh RNA-miR-125a-5p细胞中E-cadherin表达则较PC9ER-miR-125a-5p细胞降低(P=0.03);3..检测Vimentin m RNA表达水平结果显示:与PC9细胞相比,PC9ER细胞中Vimentin表达升高(P=0.03);PC9ER-miR-125a-5p细胞相较于PC9ER细胞,Vimentin表达水平反而降低(P=0.03);与PC9ER-miR-125a-5p细胞相比,下调miR-125a-5p细胞中Vimentin表达复升(P=0.007);4.Snail、Zeb1 m RNA表达水平仅在PC9ER-miR-125a-5p及PC9ER-sh RNA-miR-125a-5p两组对比中存在显著性差异:相较于PC9ER-miR-125a-5p细胞,Snail及Zeb1均在PC9ER-sh RNA-miR-125a-5p中表达增加(P=0.0071,P=0.023);5.在蛋白水平表达方面:PC9及PC9ER-miR-125a-5p两组细胞中E-cadherin表达上调,Vimentin、Snail、Zeb1均在PC9ER和PC9ER-sh RNA-miR-125a-5p细胞中表达增加。结论:在耐厄洛替尼肺腺癌细胞中,miR-125a-5p可引起EMT相应的继发性改变。伴随着间质特征性蛋Vimentin及EMT相关转录因子Snail、Zeb1表达增加、上皮特征性蛋白E-cadherin表达降低;miR-125a-5p参与调控EMT过程,可能是NSCLC-TKIs耐药的原因之一。