西瓜枯萎病生防细菌的筛选及作用机制初步研究

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我国是世界西瓜生产与消费第一大国,由尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f. sp. niveum)引起的西瓜枯萎病是一种土传维管束病害,己成为西瓜的主要病害之一,分布于各个西瓜产区,尤其在重茬西瓜地发生更为严重,成为制约我国西瓜生产的主要障碍之一。对于该病的防治,有抗病育种、轮作、嫁接换根、化学药剂防治、生物防治、物理防治等多种策略,生物防治被认为是最具发展潜力的防治方法之一,而利用内生细菌作为生防菌来防治土传维管束病害具有独特的优势,是很有应用前景的防治措施。为了筛选有效防治西瓜枯萎病的内生细菌资源,探索其生防机制而开展了本研究。以西瓜枯萎病菌为靶标菌,通过平板对峙法和生长速率法从352株植物为内生细菌和3株植物根围细菌中筛选出7株活菌或胞外代谢产物拮抗作用强的细菌。进一步测定这7株强拮抗细菌的抑菌谱,表明对番茄枯萎病菌、棉花枯萎病菌、小麦纹枯病菌等均有较强的拮抗作用。盆栽试验表明这7株强拮抗细菌对西瓜枯萎病都有一定的防治效果,其中3株内生细菌菌株Jaas ed1、Jaas ed2、Jaas ed3对西瓜枯萎病的防治效果优于化学药剂百菌清,防效分别为75.1%、64.1%、63.2%。田间试验进一步表明:这3株内生细菌对西瓜枯萎病仍有较好的防效,其中菌株Jaas ed2的防效达64.9%。通过形态特征、生理生化特征以及16S-rDNA序列分析对菌株Jaased2和Jaas ed3进行菌种鉴定,结果表明菌株Jaas ed2为多粘类芽孢杆菌,其16s-rDNA序列存GenBank上的登录号为JX849658;菌株Jaased3为枯草芽孢杆菌,其16s-rDNA序列在GenBank上的登录号为JX849659;而菌株Jaas edl本实验室已经进行了菌种鉴定为枯草芽孢杆菌。另外,对这3株内生细菌菌株Jaas ed1、Jaas ed2、Jaas ed3防治西瓜枯萎病的生防机理进行了初步研究。结果表明这3株内生细菌对西瓜苗都有明显的促生长作用,其中菌株Jaas ed3的促生长作用最为明显,西瓜苗株高增长34.15%,鲜重增加48.41%。用利福平抗性标记这3株内生细菌,证明其可在西瓜苗内的可定殖12d以上。进一步用GFP标记菌株Jaas ed1,结果表明该菌株可定殖在西瓜根部及茎部的维管束中,并且在根部定殖的数量明显多于茎部维管束中的数量。此外,还发现内生细菌菌株Jaas edl能产生抑制病原真菌生长的挥发性物质,且此挥发性抑菌物质抑制番茄灰霉病菌对离体番茄叶片的侵染和对采后草莓有保鲜作用。
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