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作为医治癌症的第四大疗法之一,肿瘤疫苗投入临床使用的前景非常可观,但是新兴手段制备的疫苗存在工序复杂、前期投入较大、产物不稳定等因素。因此,考虑到抗原来源和免疫原性等问题,寻找合适佐剂用于肿瘤全细胞疫苗不失为一种较好的途径,尤其对于小范围、个体性肿瘤治疗和研究具有积极意义。
桔梗皂苷D(Platycodin,PD)是桔梗Platycodon grandiflorum A.DC.中筛选得到的主要的免疫佐剂活性皂苷化合物。其对卵白蛋白(OVA)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和禽流感新城疫重组二联活疫苗(rL-H5)均具有显著的佐剂作用,且安全性优于目前公认的皂苷佐剂Quil A。本实验研究PD对小鼠H22肝癌全细胞苗免疫小鼠在肿瘤生长、细胞免疫和体液免疫应答上的影响,评价其对肿瘤疫疫苗的佐剂效应和作用特点,探讨其在肿瘤疫苗中应用前景。
以Quil A(20μg)为佐剂对照,小鼠H22肝癌细胞冻融裂解物(H22瘤苗)联合桔梗皂苷D(10μg、25μg、50μg)皮下注射免疫ICR小鼠。同时,设未免疫的模型对照组和抗原单独免疫对照组。首免一周后加强免疫。二免后7天,每鼠左前肢腋下接种H22细胞悬液0.2 mL。接种瘤液10天后,取瘤组织称重,计算抑瘤率;无菌条件下取脾脏,制备脾细胞悬液,检测脾细胞增殖反应、自然杀伤细胞(NK)活性、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性、肿瘤抗原特异性CTL(sCTL)活性以及脾细胞培养上清中γ干扰素(IFN-γ)含量。
PD联合H22瘤苗免疫小鼠的瘤重显著小于瘤苗单独免疫组和Quil A对照组(P<0.05、P<0.01或P<0.001),说明PD对H22瘤苗抑制肿瘤生长具有显著的佐剂作用,且活性优于Quil A。PD能显著促进Con A和LPS刺激的H22瘤苗免疫小鼠脾细胞增殖反应(P<0.05、P<0.01或P<0.001),活化瘤苗免疫小鼠T、B淋巴细胞;PD也能显著提高免疫小鼠NK细胞、CTL和sCTL细胞的活性(P<0.01或P<0.001),增强免疫小鼠对肿瘤细胞的特异性和非特异性杀伤作用。此外,PD尚能显著促进免疫小鼠脾细胞分泌IFN-γ的能力(P<0.05或P<0.01),诱导免疫小鼠产生Th1免疫应答。
综上所述,PD能促进H22瘤苗小鼠特异性和非特异性、体液免疫和细胞免疫应答反应,增强H22瘤苗对小鼠移植性H22肝癌生长的抑制作用,对H22肝癌全细胞苗具有显著的佐剂作用。PD安全性好、性质稳定、原植物资源丰富、制备工艺简单。因此,PD作为肿瘤疫苗的佐剂值得进一步深入研究。