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2012年的统计数据表明，在全球范围内，前列腺癌的发病率居男性恶性肿瘤的第二位，死亡率居第五位。近十余年来，我国前列腺癌的发病率和死亡率均明显上升，其发病率已位居我国男性恶性肿瘤的第七位。2011年，我国将前列腺癌研究列入国家“973”计划项目。雄激素受体（Androgen Receptor, AR）在前列腺癌的发生和发展中具有关键作用。AR与其配体——雄激素结合后转移至细胞核，与靶基因启动子中的特异序列（雄激素反应元件，Androgen Response Elements, AREs）结合，从而调节靶基因的表达。前列腺特异性抗原（Prostate Specific Antigen, PSA）是受AR调节的重要靶基因之一，也是公认的前列腺癌诊断和预后的监测标志物。鉴于AR信号通路在前列腺癌发生与发展中的重要作用，内分泌疗法（或称雄激素剥夺疗法，Androgen DeprivationTherapy, ADT）一直作为治疗晚期前列腺癌的经典疗法。在我国，由于前列腺癌早期筛查未得到普及，大部分病人就诊时已是晚期，因此ADT是主要的治疗方法。在ADT治疗初期，伴随病人血清中PSA浓度的降低，ADT对绝大多数病人具有较好的疗效，但几乎所有病人最终都会对该疗法产生抗性，并发展为去势抵抗性前列腺癌（Castration-Resistant Prostate Cancer, CRPC）。CRPC是前列腺癌治疗领域的难点，也是导致病人因前列腺癌而死亡的主要原因。美国食品和药物管理局最近批准的治疗CRPC的新型内分泌药物恩杂鲁胺（Enzalutamide）和阿比特龙（Abiraterone）都是以AR为靶点，阻止其活化。使用新药可使CRPC病人的存活期延长4-5个月，但绝大多数病人在服药数月后即对药物产生耐受性，并伴有血清PSA浓度的升高，提示病人CRPC细胞中AR信号通路再激活。在CRPC中，AR剪切突变体（AR splice variants, AR-Vs）的表达量普遍高于激素依赖性前列腺癌（Hormone-Naive Prostate Cancer）。迄今为止，在前列腺癌细胞系及组织中共发现25种AR-Vs，其中AR-V7（又称AR3）及ARv567es是最具有临床意义的2种AR-Vs。相关临床研究表明，若前列腺癌组织中AR-V7高表达，则该病人手术后前列腺癌复发的几率更高；在CRPC组织中若存在AR-V7高表达或ARv567es的表达，则更易发生癌症的远端转移和病人的生存期缩短。而CRPC中AR-Vs表达上调可能是前列腺癌经ADT（包括恩杂鲁胺和阿比特龙）治疗后，CRPC生长与增殖的主要适应途径。本研究通过细胞模型，揭示AR-Vs/AR-Vs、AR-FL/AR-Vs之间的相互作用，阐明AR-Vs调控靶基因表达的方式以及促进CRPC发生发展的分子机制。利用分子克隆技术将AR-FL、AR-V7及ARv567es的cDNA克隆至双分子荧光片段互补（BiFc）系统中，并通过脂质体转染的方法，分别将上述表达质粒转染至AR null前列腺癌细胞系PC-3中。Western Blot技术检测目的蛋白的表达情况；荧光显微镜观察转染后细胞中AR-Vs/AR-Vs及AR-FL/AR-Vs的二聚化情况，探寻发生二聚化的作用位点；流式细胞术对荧光强度进行量化；激光共聚焦显微镜观察二聚化的AR-Vs/AR-Vs及AR-FL/AR-Vs的细胞内定位；雄激素反应元件报告基因系统检测AR-Vs/AR-Vs二聚体及AR-FL/AR-Vs二聚体的转录活性；qRT-PCR检测AR-Vs/AR-Vs二聚体及AR-FL/AR-Vs二聚体对靶基因（UBE2C、PSA）表达的影响；SRB检测AR-Vs/AR-Vs二聚化及AR-FL/AR-Vs二聚化促进前列腺癌细胞去势抵抗性生长的影响。Western blot结果表明，成功构建BiFc表达质粒BiFc-AR-FL、BiFc-AR-V7及BiFc-ARv567es；利用BiFc系统在荧光显微镜下观察及流式细胞术定量结果表明，AR-Vs/AR-Vs二聚化主要由D-box介导，而AR-FL/AR-Vs二聚化主要由FxxFL及D-box介导；激光共聚焦显微镜观察发现，AR-Vs二聚化对于其细胞定位并无影响，提示AR-Vs进入细胞核并不依赖于二聚化，而AR-FL/AR-Vs的二聚化对于AR-FL非雄激素介导的细胞核转移是必要的；雄激素反应元件报告基因及qRT-PCR结果显示，AR-Vs/AR-Vs二聚体及AR-FL/AR-Vs二聚体具有转录活性，可以调控其靶基因的表达；SRB结果表明，AR-Vs/AR-Vs二聚化或/和AR-FL/AR-Vs二聚化共同作用，可促进前列腺癌细胞去势抵抗性生长。以上研究提示，在ADT条件下，AR-Vs可通过AR-Vs/AR-Vs和/或AR-FL/AR-Vs二聚体调控靶基因的表达，促使前列腺癌细胞去势抵抗性生长。