【摘 要】
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目的:探究腺病毒介导的hNT-3基因转染对兔前交叉韧带重建术后肌腱移植物本体感受器再生的影响,以及转染后hNT-3基因在肌腱移植物中的表达情况。研究方法:将日本大耳白兔随机分成A、B、C三组,制作膝关节前交叉韧带损伤后自体半腱肌肌腱移植的动物模型。A、B两组自体半腱肌肌腱移植物内分别用微量注射器多点注射腺病毒载体Ad hNT-3与腺病毒空载体Ad GFP,C组注射生理盐水作为对照。术后48h,分别
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目的:探究腺病毒介导的hNT-3基因转染对兔前交叉韧带重建术后肌腱移植物本体感受器再生的影响,以及转染后hNT-3基因在肌腱移植物中的表达情况。研究方法:将日本大耳白兔随机分成A、B、C三组,制作膝关节前交叉韧带损伤后自体半腱肌肌腱移植的动物模型。A、B两组自体半腱肌肌腱移植物内分别用微量注射器多点注射腺病毒载体Ad hNT-3与腺病毒空载体Ad GFP,C组注射生理盐水作为对照。术后48h,分别从A、B、C三组中取自体肌腱移植物做冰冻切片,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)表达情况。术后8周、16周、24周,分别从A、B、C三组中取标本行免疫组织化学染色和HE染色,观测本体感受器。术后2周、4周、6周、8周,分别从A、B、C三组中取标本行Western-Blot和PCR检测,观察hNT-3表达情况。结果:荧光显微镜下观察,在A、B两组中可见绿色荧光蛋白表达,C组中未见;A、B、C三组中本体感受器的数目随着术后恢复时间的延长而增加,相同的时间点A组本体感受器的数目多于B、C两组,差异有统计学意义(P<0.05);Western-Blot显示,在术后不同的时间点,A组中NT-3表达量分别高于B组、C组,且各组中的NT-3表达量随着术后时间的推移而逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05);PCR显示A组中hNT-3 mRNA表达量在术后随着术后时间的推移而逐渐降低,直至术后第8周都能检测到,差异有统计学意义(P<0.05);而B组和C组中未检出hNT-3 mRNA表达。结论:腺病毒介导的hNT-3基因转染能够促进前交叉韧带损伤重建术后自体肌腱移植物内本体感受器的再生,并且hNT-3基因能够在肌腱移植物内至少持续表达8周。
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