Choke vessels血流灌注量对跨区皮瓣血管形态及组织代谢的影响

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目的:通过制备小鼠背部单穿支及多穿支跨区皮瓣模型,采用激光多普勒血流仪、HE、Masson染色以及葡萄糖和乳酸代谢水平检测等方法,探讨不同程度的血流灌注量对皮瓣中央choke区的血管形态以及组织代谢水平的影响。材料和方法:清洁级雄性balb/c小鼠,体重21-26g,100只,随机分成3组。选择小鼠背部包括两个胸背穿支和两个髂腰穿支在内的跨区皮瓣作为建模标准,皮瓣大小5cm×3cm。四条穿支分别记为左上、左下、右上、右下,它们在皮瓣中央形成网状吻合区,即:中央choke区。通过结扎不同数量的穿支血管建立小鼠背部单穿支和多穿支跨区皮瓣模型,A组结扎右胸背穿支;B组结扎右胸背穿支和右髂腰穿支;C组结扎除左胸背穿支外的其余三条穿支。采用激光多普勒血流仪对术前、术后1d、3d、7d、10d、13d流经皮瓣中央choke区的血流量进行连续动态的监测,并观察皮瓣内血管的形态学变化特点;通过HE、Masson染色从微观角度进一步观察血管形态学的变化特点,并进行微血管计数;运用全自动生化分析仪上检测各组动物皮瓣内葡萄糖、乳酸的含量;Elisa检测相关细胞因子的表达。结果:(1)血流量变化特点:各实验组术后流经中央choke区的血流值有明显差异,从术后1天到13天,A、B两组血流量在术后各时间点呈现递增的趋势;C组血流量于术后1天有增加,随后到第3天逐渐降低,之后从第7天到第13天逐渐升高。(2)血管形态学变化特点:术后各组中央choke区的血管管径均扩张明显,在外科延迟术后第3天时,蒂部血管曲度增加,HE、Masson染色显示皮瓣中央choke区的血管管径增粗和管壁的增厚;从血管数量上来看,在术后13天时C组的血管计数(15.65±0.46)较A组(10.29±0.87)和B组(11.24±0.37)更多。(3)组织代谢水平:各组在术后第1天至第3天,葡萄糖水平逐渐升高,然而乳酸水平逐渐下降;在术后第3天到第7天,葡萄糖水平下降而乳酸水平升高。实验A从第7天到第10天组织葡萄糖水平是下降的,而从第10天到第13天组织葡萄糖水平是上升的。其余各组在第7天到第13天组织葡萄糖水平是逐步上升的,尤其以实验C组上升幅度最为明显。(4)细胞因子的表达:VEGF、IL-1α蛋白表达显著不同,在术后3天和13天,各组VEGF的蛋白含量都有明显的增加;但是在术后3天和13天,各组的IL-1α的表达差异明显,其中实验C组IL-1α水平是明显低于实验A、B两组。结论:三种外科延迟术中,单穿支跨区皮瓣choke区微循环状态最佳,可能与其炎症因子释放减少,促进血管新生有关。
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