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玉米作为三大粮食作物之一,在饲料生产中扮演重要的角色,也为生物能源制造提供良好原材料；伴随人口的增长、人民生活水平的提高,以及畜牧业的极速发展,对玉米需求量显著增加。田间的杂草与玉米竞争阳光和肥料,形成草害,引起减产,严重制约了玉米产量的增加。人工拨草和机械除草费时费力且效果不理想；化学除草方便、经济有效,业已成为现代农业技术重要组成部分。目前,全世界农业生产中使用量最大最广泛的除草剂是草甘膦。由于草甘膦杀草谱比较宽,对玉米也具有灭生性作用,这就使在玉米生产中使用草甘膦受到限制。因此,培育出具有自主知识产权的抗草甘膦的玉米新品种,进行试验、示范、推广,能降低除草成本和劳动强度、提高工作效率、增强我国玉米的国际市场竞争力。本研究主要是将抗草甘膦的抗性基因2mg2-epsps插入到植物表达载体pCAMBIA3301中,以农杆菌菌株EHA105携带含有目的基因的表达载体进行介导转化,遗传转化受体材料为自交系18-599R的幼胚；实验首先探讨了热激与离心对幼胚浸染的影响,并对农杆菌转化玉米幼胚过程中幼胚大小、筛选剂浓度,头孢霉素浓度等因素进行优化,为建立良好的玉米幼胚转化体系奠定基础；获得抗草甘膦转基因玉米植株,并进行的PCR检测与产物测序,结果表明目的基因已整合到玉米基因组中；对阳性植株进行叶面喷施草甘膦,结果表明转基因玉米后代具有草甘膦抗性。主要研究结果如下：1目的基因的获得。以表达载体P35S-2301-EPSPS为模板,用高保真酶扩增获得目的基因片段并测序,利用NCBI的在线软件Blast、ORF Finder分析,结果表明,扩增的序列全长为1563bp,编码464个氨基酸；与原始载体基因碱基序列同源性为99%,氨基酸序列匹配度为100%。2表达载体构建。将构建好pMD19T-2mg2-epsps载体和pCAMBIA3301表达载体同时进行双酶切,回收目的片段并进行连接转化；经酶切、测序验证结果表明所连接确实为目的片段,没有发生突变。3玉米幼胚遗传转化系统的优化。首先探讨了热激与离心对幼胚浸染的影响,并对农杆菌转化玉米幼胚过程中幼胚大小、头孢霉素浓度、筛选剂浓度等因素设置不同水平处理,结果表明：最适合的处理条件为热激40℃,3min,冷处理25℃,2min,不离心,此处理得到最高的抗性愈伤得率为52%；浸染的幼胚大小为0.8-1.3mm时,可以得到质地较好的愈伤组织；头孢霉素为400mg/L的浓度的不仅可以抑制农杆菌生长,还可以保持幼胚良好的生长状态；利用不同浓度的草甘膦对浸染的幼胚进行筛选,比较理想的筛选浓度为1.5-2.0mmol/L。4转基因苗的PCR鉴定。对96株To代再生植株进行多次重复的PCR鉴定,15株再生植株的基因组DNA扩增出与阳性对照大小一致的的片段,表明目的基因已经成功转入玉米基因组中；T1代株系进行PCR检测,获得四株转基因株系,这些阳性的株系经RT-PCR检测,表明抗草甘膦基因在mRNA水平上得到了有效转录；对阳性植株进行叶面喷施草甘膦,结果表明转基因玉米后代具有草甘膦抗性。。