目的：本实验拟用蛋白质组学技术检测急性髓系白血病（acute myeloidleukemia,AML）多药耐药病人骨髓中表达的特异性蛋白质，对已知蛋白质或未知的蛋白质进行排查，确定可能在多药耐药中具有意义的多药耐药相关蛋白质类，为早期发现多药耐药提供依据。方法：1.研究对象实验标本来源于16例急性髓系白血病病人的骨髓穿刺，中位年龄37.4岁（13～67岁）。诊断是根据世界卫生组织分类系统做出，其主要是基于形态特征、临床表现、免疫表型和遗传学特征。根据病人化疗的疗效不同将病人分为耐药组和化疗敏感组。2.双向电泳细胞裂解液裂解细胞、冰上冻融提取蛋白质样品并分装，取部分样品进行蛋白质定量。应用IPGphor3等电聚焦系统和Ettan DALTsix Large垂直电泳系统进行双向电泳，Imagemaster2D platinum软件分析凝胶，找出表达差异的点。3.质谱分析切取差异明显的蛋白质点，原位酶解并进行质谱分析。4.蛋白质数据库查询获得蛋白质点的准确肽质量指纹数据后，将该套肽片段数据输入数据库进行搜寻以确定蛋白质的最后归属。结果：每组样品双向电泳重复三次，获得较好重复性。经ImageMasster2-D软件分析，耐药组检测出的蛋白质点为638±39个，化疗敏感组检测出的蛋白质点为704±34个。耐药组较化疗敏感组表达升高的点共有10个，耐药组较化疗敏感组表达降低的点共19个。耐药组和化疗敏感组分别切取5个差异明显的蛋白质点进行酶切和质谱分析。共对10个差异明显的蛋白质点进行质谱鉴定，其中3个点质谱分析的分值低于60，因此认为结果不可信。另外有7个被鉴定出的蛋白质点中，8号和25号、36号和37号为同一蛋白质，实际上鉴定出的差异蛋白质为5种，分别为：Filamin-A、Actin、Peroxiredoxin-6、Fibrinogen gamma chain、60kDa heatshock protein。结论：耐药组与化疗敏感组之间的蛋白质表达存在差异，其中耐药组高表达Peroxiredoxin-6（硫氧还蛋白过氧化物酶）和60kDa heat shock protein，mitochondria（热休克蛋白60），病人疗效较差；敏感组高表达Filamin-A（细丝蛋白A）、Actin, cytoplasmic1（β-肌动蛋白）、Fibrinogen gamma chain（纤维蛋白原γ链），疗效较好。鉴定出的5种差异表达蛋白质可能参与急性髓系白血病细胞对化疗药物的应答，从而诱导多药耐药，对预知白血病病人耐药具有一定的指示作用。