本文分为以下两个部分：　　实验第一部分 加味黄芪赤风汤对IgA肾病大鼠肾脏的保护作用　　目的:　　观察加味黄芪赤风汤对IgA肾病大鼠蛋白尿的治疗作用和对肾脏病理的改善，以研究该方对IgA肾病大鼠肾脏的保护作用。　　方法:　　采用牛血清蛋白(bovine serum albumin，BSA)+四氯化碳(carbon tetrachloride，CCL4)+脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）方法制造IgA肾病大鼠模型，第10周鉴定造模是否成功。大鼠IgA肾病造模成功后，依据随机数字表将其随机分为空白组、模型组、替米沙坦组、加味黄芪赤风汤高剂量组、加味黄芪赤风汤中剂量组、加味黄芪赤风汤低剂量组（以上三组简称中药高、中、低剂量组），共6组，每组各10只大鼠。每组分别给予相应药物干预，给药周期为8周。实验共计18周。每2周检测大鼠24小时尿蛋白定量。实验结束时采用腹主动脉采血，离心后取血清，用全自动生化分析仪检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清白蛋白(ALB)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平。腹主动脉采血后迅速摘取肾脏组织。肾脏组织取材后，光学显微镜下（分别采用HE染色、PASM染色和Masson染色法）观察各组肾小球病理变化，采用Katafuchi评分标准判定肾脏病理损伤程度。免疫荧光下观察各组肾小球系膜区IgA荧光沉积，采用半定量标准评价免疫荧光IgA沉积的强度。电子显微镜下观察各组肾小球超微结构的病理变化。　　结果:　　1.24小时尿蛋白定量检测分2个阶段:造模阶段和药物干预阶段。在造模阶段，从第6周开始，造模组与同时期对照组比较，有统计学差异(P＜0.05)。药物干预阶段:组间比较，与同时期模型组比较，替米沙坦组和中药高、中、低剂量组蛋白尿均下降，有统计学差异（均P＜0.05）;与同时期替米沙坦组比较，中药高、中组蛋白尿下降程度无明显统计学差异（均P＞0.05）。组内不同时间点比较，模型组蛋白尿治疗后期较治疗前期下降无统计学差异(P＞0.05)，而替米沙坦组和中药高中低剂量组蛋白尿治疗后期较治疗前期均有下降，有统计学差异(均P＜0.05)。　　2.经药物干预8周后（即实验第18周末）检测血生化相关指标，各组Scr、BUN、ALB、ALT、AST不同时间点组内及组间相互比较，均无统计学差异(均P＞0.05)。　　3.光镜下观察HE、PASM及Masson染色后的肾脏标本:空白组:肾脏组织肾小球结构正常，血管腔清晰，系膜细胞与系膜基质未见增生、纤维化、玻璃样病变表现，球囊壁光滑;肾小管管腔规则，间质无炎细胞浸润及纤维组织增生。模型组:肾小球表现出代偿性扩张和萎缩病变，血管球肿胀、充血，部分肾小球毛细血管球肿胀从出现明显的分叶状、结节状病变或压迫性萎缩。局部肾小球系膜基质增生，基底膜增厚，球囊壁变窄;肾小管细胞肿胀，空泡变性，部分肾小管内可见管型形成;间质中见少量炎细胞浸润及纤维组织增生。替米沙坦组:肾小球扩张程度略减轻，血管球轻度充血，系膜基质增生不明显，球囊壁未见粘连;少量肾小管上皮细胞肿胀，空泡变性，间质极少量炎细胞浸润。中药高、中、低剂量组:病变明显比模型组减轻，表现为血管球轻度，肾小球系膜基质轻度增生，基底膜轻度增厚，未见球囊粘连;肾小管上皮细胞肿胀程度较轻，空泡变性程度减轻，间质可见少量炎症细胞侵润。以大、中两剂量较好，小剂量效果略差。　　4.免疫荧光下观察IgA沉积:空白组大鼠肾小球系膜区无明显IgA荧光沉积，荧光强度为-～±;模型组大鼠肾小球系膜区可见颗粒状或团块状IgA荧光沉积，其荧光强度为++～+++;替米沙坦组和中药高、中、低剂量组在肾小球系膜区均可见到颗粒状或团块状IgA荧光的沉积，其中替米沙坦组和中药高、中、低剂量组荧光强度为±～++。IgA荧光沉积半定量法评定IgA荧光沉积强度，采用分层资料的方差分析，并校正检验水准为P＜0.008。经统计，与空白组比较，模型组IgA荧光沉积有统计学差异(P=0.000＜0.008);与模型组比较，替米沙坦组和中药高、中、低剂量组IgA荧光沉积强度有统计学差异（P值分别为0.000、0.000、0.000、0.001，均P＜0.008）;与替米沙坦组比较，中药高、中、低剂量组IgA荧光沉积强度无统计学差异（P值分别为1.000、0.672、0.084，均P＞0.008）;与中药高剂量组比较，中药中、低剂量组IgA沉积强度无统计学差异（P值分别为0.586、0.050，均P＞0.008）。　　5.电镜下观察肾组织超微结构:空白组系膜区未见电子致密物，足突排列有序，大小均一，基底膜厚薄一致;模型组系膜区散在大片高密度电子致密物，足突大片融合，局部脱落，基底膜薄厚不一;替米沙坦组系膜区散在少量高密度电子致密物，足突局部见融合，基底膜厚度较一致;中药高剂量组系膜区散在极少量高密度电子致密物，足突少量融合，基底膜厚度均匀一致;中药中剂量组系膜区散在少量高密度电子致密物，足突少量融合，小灶脱落，基底膜薄厚不一;中药低剂量组系膜区散在中等量高密度电子致密物，多数足突可见融合，小灶脱落，基底膜薄厚不一。　　结论:　　1.加味黄芪赤风汤可明显降低IgA肾病大鼠24小时尿蛋白定量。　　2.加味黄芪赤风汤可以减轻IgA肾病大鼠肾脏的病理损伤，发挥肾脏保护作用。　　实验第二部分 加味黄芪赤风汤对IgA肾病大鼠肾脏TLR4信号通路的影响　　目的:　　研究加味黄芪赤风汤对IgA肾病大鼠肾脏TLR4信号通路的影响，基于TLR4信号通路探讨该方治疗IgA肾病的可能分子机制。　　方法:　　造模、分组、给药、取材等方法同实验第一部分。取新鲜肾脏组织部分肾皮质，石蜡包埋，留待行免疫组化检测;部分肾组织肾皮质用锡纸包裹，标记后迅速置于液氮中留存，用于提取肾组织总蛋白和总RNA，留待行Western Blot、RT-PCR法检测。取上述肾组织，分别采用免疫组化、Western Blot、RT-PCR检测方法检测TLR4信号通路关键蛋白TLR4、MyD88、NF-κB P65及其下游炎性细胞因子IL-4、MCP-1和纤维化分子TGF-β1的表达。　　结果:　　1.肾组织蛋白免疫组化检测结果显示:模型组肾组织TLR4、MyD88、NF-κB P65、IL-4、MCP-1、TGF-β1蛋白的表达水平升高，与空白组比较有统计学差异(P＜0.05);替米沙坦组及中药高、中、低剂量组TLR4、MyD88、NF-κB P65、IL-4、MCP-1、TGF-β1蛋白的表达水平下降，与模型组比较均有统计学差异(P＜0.05);中药高、中、低剂量组TLR4、MyD88、NF-κB P65、IL-4、MCP-1、TGF-β1蛋白的表达水平，与替米沙坦组比较均无统计学差异(P＞0.05)。　　2.肾组织蛋白Western Blot检测结果显示:模型组肾组织TLR4、MyD88、NF-κB P65、IL-4、MCP-1、TGF-β1蛋白的表达水平升高，与空白组比较有统计学差异(P＜0.05);替米沙坦组及中药高、中、低剂量组TLR4、MyD88、NF-κB P65、IL-4、MCP-1、TGF-β1蛋白的表达水平下降，与模型组比较均有统计学差异(P＜0.05);中药高、中、低剂量组TLR4、MyD88、NF-κB P65、IL-4、MCP-1、TGF-β1蛋白的表达水平，与替米沙坦组比较均无统计学差异(P＞0.05)。　　3.肾组织相关分子mRNA RT-PCR检测结果显示:模型组肾组织TLR4mRNA、MyD88mRNA、NF-κB P65mRNA、IL-4mRNA、MCP-1mRNA、TGF-β1mRNA的表达水平升高，与空白组比较有统计学差异(P＜0.05);替米沙坦组及中药高、中、低剂量组TLR4mRNA、MyD88mRNA、NF-κB P65mRNA、IL-4mRNA、MCP-1mRNA、TGF-β1mRNA的表达水平下降，与模型组比较均有统计学差异(P＜0.05);中药高、中、低剂量组TLR4mRNA、MyD88mRNA、NF-κB P65mRNA、IL-4mRNA、MCP-1mRNA、TGF-β1mRNA的表达水平，与替米沙坦组比较均无统计学差异(P＞0.05)。　　结论:　　1.IgA肾病大鼠肾组织TLR4信号通路相关分子TLR4、MyD88、NF-κB P65的表达水平升高。　　2.IgA肾病大鼠肾组织TLR4信号通路下游炎性细胞因子IL-4、MCP-1的表达水平和纤维化分子TGF-β1的表达水平升高。　　3.加味黄芪赤风汤可以下调TLR4信号通路相关分子TLR4、MyD88、NF-κBP65的表达水平。　　4.加味黄芪赤风汤可以下调TLR4信号通路下游炎性细胞因子IL-4、MCP-1的表达水平和纤维化分子TGF-β1的表达水平，从而抑制肾脏炎症反应和肾脏纤维化。　　5.加味黄芪赤风汤对IgA肾病大鼠肾脏的保护作用，可能与该方下调TLR4信号通路抑制肾脏炎症反应和肾脏纤维化有关。