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目的:观察尾叶香茶菜二萜类化合物B(DB)对小鼠前列腺癌细胞株RM-1细胞周期的影响并分析其机制,为前列腺癌的治疗提供理论依据和治疗线索。方法:采用MTT比色法观察不同时间、不同剂量的DB对RM-1细胞增殖率的影响;应用相差显微镜观察其对RM-1细胞形态的影响;采用流式细胞术分析细胞周期的变化;利用RT-PCR方法观察DB作用后RM-1细胞P53,CDK2,CHK1,GRIM-19,STAT3的mRNA表达;免疫印记(Western blot)方法检测P53, CDK2,GRIM-19的蛋白表达。结果:(1)MTT实验结果显示:DB可抑制RM-1细胞的增殖,呈时间、剂量依赖性;(2)形态学观察:经DB处理后的RM-1细胞出现生长抑制,细胞贴壁不佳,部分细胞变圆,体积缩小,且有部分细胞漂浮;(3)流式细胞术检测发现:DB可阻滞RM-1细胞的细胞周期进程,主要阻滞在G1期;(4)RT-PCR结果显示: DB (2μg/ml,4μg/ml,8μg/ml)分别作用RM-1细胞12h,24h,48h后,P53,CHK1,GRIM-19 mRNA的含量明显高于对照组,CDK2,STAT3 mRNA的含量明显低于对照组(P<0.05);(5)Western blot结果表明:DB ( 2μg/ml,4μg/ml,8μg/ml)分别作用RM-1细胞12h,24h,48h后,P53,GRIM-19蛋白水平与对照组比较增强,而CDK2蛋白表达水平较对照组减弱。结论:尾叶香茶菜二萜类化合物B可抑制RM-1细胞增殖,呈时间剂量依赖性。细胞增殖抑制与DB阻滞细胞周期于G1期有关,其机制可能是通过细胞周期相关通路P53-CDK2途径在G1-S期的调控实现的,即激活P53的表达,继而抑制CDK2的活性,从而阻碍细胞进入DNA合成期;同时GRIM-19-STAT3-CDK2途径可能也参与细胞周期G1期停滞的过程。