目的:胶质瘤是最常见的原发性中枢神经系统肿瘤,发生于神经外胚层,起源于神经胶质,有较强的侵袭性及复发性,死亡率高。然而,胶质瘤的具体发病机制至今仍不十分明确,治疗手段相对局限。近年来随着分子生物学研究的进展,越来越多的研究者发现非编码RNA与胶质瘤的发生、发展存在密切的关系,靶向调控非编码RNA可能成为治疗胶质瘤的新方向。人浆细胞瘤转化迁移基因1(Plasmacytoma variant translocation 1,PVT1)是长链非编码RNAs(long non-coding RNA,lncRNAs)的一种,在胃癌、卵巢癌、胰腺癌、非小细胞肺癌、肝癌、乳腺癌等组织中均呈现异常高表达。关于PVT1在胶质瘤中的作用及机制目前尚未见报道。miRNAs是一类内源性,长度约为18-25nt的非编码RNA。哺乳动物中存在大量的miRNAs,70%在脑组织中有表达,能够参与神经细胞的生长发育,并且调控多种神经系统肿瘤的生物学行为。MiR-190位于15q22.2,能够参与多种肿瘤的发生。MiR-190在多种肿瘤中显著上调,如膀胱癌,乳腺癌,肺癌,肝癌等。相反的,miR-190在直肠癌和胶质母细胞瘤中下调。miR-488位于1q25.2,与中枢性多食、肥胖有关,在前列腺癌、胃肠道间质瘤中表达下调,能够在骨关节炎软骨组织中起到保护作用。但miR-488在胶质瘤中未见报道。肌细胞增强因子2C(Myocyte enhancer factor 2C,MEF2C)是转录因子MADS-BOX家族成员之一,在肝癌、横纹肌肉瘤及白血病等多种肿瘤中发挥原癌基因的作用,但在胶质瘤中的作用未见报道。JAGGED1是Notch1的配体,能够促进胶质瘤的增殖、迁移及侵袭。通过生物信息学软件预测发现PVT1与miR-190a-5p和miR-488-3p存在结合位点、miR-190a-5p和miR-488-3p与MEF2C存在结合位点,而且JAGGED1可能是MEF2C的下游靶基因。本研究旨在探讨PVT1、miR-190a-5p、miR-488-3p及MEF2C在胶质瘤中的作用及潜在机制,进一步探寻胶质瘤治疗的新靶点。研究方法:1、Real-time PCR检测PVT1、miR-190a-5p、miR-488-3p、MEF2C mRNA的内源性表达;2、双荧光素酶报告基因验证PVT1与miR-190a-5p或miR-488-3p、MEF2C与mi R-190a-5p或miR-488-3p的结合位点;3、在U251及U87细胞中稳定转染PVT1沉默质粒、MEF2C沉默质粒、MEF2C过表达质粒;瞬时转染miR-190a-5p及miR-488-3p模拟物,进而获得PVT1沉默、miR-190a-5p或miR-488-3p过表达及沉默、MEF2C过表达及沉默等细胞;4、CCK-8实验检测细胞增殖能力;5、流式细胞仪检测细胞凋亡;6、Transwell实验检测细胞的迁移及侵袭能力;7、Western Blot检测MEF2C及JAGGED1蛋白的表达;8、CHIP实验验证MEF2C及JAGGED1启动子区的结合;9、裸鼠移植瘤实验检测移植瘤的生长及裸鼠生存期。结果:1、PVT1在胶质瘤组织及细胞系中表达升高,沉默PVT1的表达显著降低胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭力,并促进细胞凋亡。2、PVT1能够靶向结合miR-190a-5p和miR-488-3p,沉默PVT1的表达上调了miR-190a-5p和miR-488-3p。3、miR-190a-5p和mi R-488-3p在胶质瘤组织及细胞系中表达降低,过表达miR-190a-5p和miR-488-3p显著抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭力,并促进细胞凋亡。4、与PVT1沉默组相比,沉默PVT1表达并同时过表达miR-190a-5p或miR-488-3p组显著抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭力,并促进细胞凋亡。5、miR-190a-5p和miR-488-3p分别能够结合MEF2C的3’UTR并抑制MEF2C表达。6、MEF2C在胶质瘤组织及细胞中表达升高,沉默MEF2C的表达显著抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭力,并促进细胞凋亡。7、MEF2C能够结合JAGGED1的启动子区,促进JAGGED1的表达。沉默MEF2C的表达显著降低胶质瘤细胞中JAGGED1的表达,抑制细胞的增殖、迁移及侵袭力,并促进细胞凋亡。8、过表达miR-190a-5p或miR-488-3p并同时过表达MEF2C能够逆转miR-190a-5p或miR-488-3p对胶质瘤细胞生物学行为及JAGGED1表达的抑制作用。9、沉默PVT1的表达同时过表达miR-190a-5p和miR-488-3p能够显著抑制裸鼠移植瘤的生长,延长裸鼠生存时间。结论:1、PVT1、MEF2C在胶质瘤组织及细胞系中表达升高,miR-190a-5p和miR-488-3p在胶质瘤组织及细胞系中表达降低。2、沉默PVT1的表达能够分别上调miR-190a-5p、miR-488-3p的表达,进而抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭力,促进细胞凋亡。3、PVT1分别靶向结合miR-190a-5p、miR-488-3p,进而减弱miR-190a-5p和miR-488-3p对MEF2C的负性调控作用。4、JAGGED1是MEF2C的靶基因。沉默MEF2C的表达能够抑制胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭力,促进细胞凋亡,降低JAGGED1的表达。5、沉默PVT1的表达同时过表达miR-190a-5p、miR-488-3p能够显著抑制胶质瘤的生长,延长裸鼠生存时间。6、PVT1-miR-190a-5p/miR-488-3p-MEF2C-JAGGED1通路能够调节胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭等生物学行为。