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论文在调研大量文献的基础上,以夏枯草(Prunella Vulgaris L.)中三萜类药用成分为目标,研究了湖北产夏枯草中齐墩果酸(Oleanolic acid,简称OA)和熊果酸(Ursolic acid,简称UA)的提取、分离纯化及测定方法,并对所得的熊果酸单体通过UV、IR、1HNMR、13CNMR等分析手段进行了结构表征。具体内容如下:(1)齐墩果酸和熊果酸的提取。运用正交设计得到了溶剂提取法提取夏枯草中齐墩果酸和熊果酸的最佳实验条件:在85℃下,用95%(v/v)乙醇溶液提取两次,第一次2h,第二次1h,料液比为1:15,夏枯草中齐墩果酸和熊果酸的提取量分别达到1.24 mg/g和2.45 mg/g。与溶剂提取法相比,超声提取耗时短,但提取量较低。(2)齐墩果酸和熊果酸的分离纯化。选择溶剂萃取法和酸碱沉淀法对夏枯草提取液进行初步纯化,而后通过硅胶柱层析和重结晶对粗产品进行精制,得到A、B两种产品。产品A中熊果酸的纯度由上柱前的28.58%上升到90.30%,收率为25.10%;产品B中齐墩果酸和熊果酸的总含量为92.15%,收率为24.81%。另外,尝试通过X-5型大孔吸附树脂富集纯化两种三萜酸,最终产品中两者共存,总含量为83.30%,收率为70.10%。(3)齐墩果酸和熊果酸的测定和结构表征。采用RP-HPLC对夏枯草提取液和分离纯化中间产物进行定量分析。通过实验确定分析条件为:色谱柱,Hedera ODS-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相,甲醇-水-冰醋酸(85:15:0.2);流速,0.8 mL/min;检测波长,λ=210 nm;进样量,10μL;柱温,30℃。齐墩果酸和熊果酸分别在18-360μg/mL和19.5-390μg/mL范围内线形关系良好。采用UV、IR、1HNMR、13CNMR等分析手段确定从夏枯草中分离得到的产品A为熊果酸单体。(4)齐墩果酸和熊果酸的毛细管电泳分离。建立了羟丙基-β-环糊精修饰、同时分离齐墩果酸和熊果酸的毛细管胶束电动色谱法,并且测定了夏枯草中两种异构体的含量。以pH为9.0的10 mmol/LNa2B4O7-10 mmol/L NaH2PO4-50 mmol/L SDS-15mmol/L HP-β-CD-6%(v/v)甲醇作为背景电解质溶液,15 min内实现了两种待测组分的基线分离,并与高效液相色谱手性流动相添加剂法做了相应的比较。