棉籽及其加工产品营养价值高,产量大,是我国重要的饲料资源,但因其含有游离棉酚(FG)、环丙烯类脂肪酸(CPFA)等有毒有害物质而限制了其在畜禽饲料中的应用,特别因其在蛋禽日粮中过量添加可造成蛋黄变硬,形成“橡皮蛋”而备受关注。目前关于棉籽中引起“橡皮蛋”的关键成分尚存在争议,其形成的生物学机制尚不清楚。因此,本研究通过动物试验,研究低油棉籽粕和无棉酚棉籽油对蛋鸡生产性能、健康状况及鸡蛋品质的影响;探明棉籽加工产物致鸡形成“橡皮蛋”的关键因素;阐明“橡皮蛋”形成的生物学机制。试验一棉子油和棉籽粕对产蛋鸡生产性能、蛋品质和健康的影响以“玉米+豆粕+豆油”日粮为基础,设置0%、6%和12%三个棉籽粕添加水平以及0%、2%和4%三个棉籽油添加水平,采用2×3因子设计,将162只24周龄海兰褐壳蛋鸡随机分配到9个处理组。正式的试验持续8周,在饲养过程中,采集生产性能数据,检测蛋品质;在饲养结束后,采集血清样品并进行生化指标测试。结果表明:1)日粮中单独添加12%的棉籽粕(FG=83.3 mg/kg)可显著增加蛋黄颜色和蛋壳厚度(P<0.05),但对产蛋鸡的生产性能和健康无显著影响。2)日粮中添加棉子油(58 mg/kg≤CPFA≤116.0 mg/kg)可轻微增加蛋黄颜色(P<0.01);显著降低产蛋鸡的产蛋率、平均蛋重和饲料转化率(P<0.01);显著提高血清中肌酐(P<0.01)、总蛋白(P<0.01)、白蛋白(P<0.01)、葡萄糖(P<0.05)和胆固醇(P<0.01)的含量。试验二棉子油和棉籽粕对鸡蛋黄物理性质和组成成分的影响为了明确导致“橡皮蛋”产生的日粮因素,并初步阐明“橡皮蛋”形成的机理,对饲养实验中各组鸡蛋进行物理性质和主要成分的检测。使用质构仪对经过不同储藏条件的鸡蛋的熟蛋黄进行挤压测试;使用流变仪检测鸡蛋在升温过程中粘性和弹性的变化;应用GC-MS检测蛋黄的脂肪酸组成;应用SDS-PAGE方法检测蛋黄中蛋白质的组成。结果表明:1)日粮中添加棉籽油显著增加了熟蛋黄的硬度、弹性和咀嚼性等,是导致“橡皮蛋”产生的主要日粮因素;冷藏保存2周与棉子油的添加存在协同效应,可促进“橡皮蛋”的产生。2)日粮中添加棉子油对蛋黄在液态和凝胶态时的粘、弹性无显著影响,但可显著增加蛋黄液加热固化后的弹性(P<0.05)。3)棉子油的添加不会造成环丙烯类脂肪酸在蛋黄中的沉积,但可显著提高蛋黄中饱和脂肪酸的含量(P<0.05),降低单不饱和脂肪酸的含量(P<0.01),并保持二者总量基本不变。4)棉子油的添加可显著提高蛋黄中总蛋白质的含量(P<0.05),并改变卵黄颗粒和浆质中蛋白质的组成(P<0.05)。实验三棉子油的添加对产蛋鸡肝脏基因表达的影响为了进一步阐明“橡皮蛋”产生的生物学机制,饲养结束后,每组随机采集三只蛋鸡的肝脏,提取RNA,应用RNA-Sequence方法检测,并对差异表达基因进行分析。结果表明,日粮中添加棉子油:1)可导致肝脏中编码载脂蛋白A的基因表达显著上调,从而提高高密度脂蛋白在血液中的运输能力。2)可使编码热应激蛋白hsp70、hsp90、hsp110和CRYAA的基因表达发生显著变化,通过影响蛋白质的修饰改变蛋白质的空间构象。3)可使编码溶质载体和钠钾泵的基因显著下调,影响离子代谢。4)可使编码促进乙酰辅酶A生成的酶和促进乙酰辅酶A进入脂肪酸合成路径的酶的多个基因表达量显著上调,促进肝脏中饱和脂肪酸的合成。综上所述,本试验得出以下结论:1)当日粮中添加不高于12%棉籽粕(FG≤83.26 mg/kg),对产蛋鸡的生产性能、蛋品质和健康无显著不良影响。2)日粮中过量添加棉子油可显著降低生产性能,损害蛋鸡健康,影响蛋黄中脂蛋白的组成,并导致“橡皮蛋”的产生。棉籽中环丙烯类脂肪酸(棉籽油)是致蛋鸡产生“橡皮蛋”的关键因素,因此蛋鸡日粮中棉子油的含量建议不超过2%,且CPFA含量不超过58 mg/kg。3)环丙烯类脂肪酸可通过影响脂肪酸的生成、蛋白结构的修饰和脂蛋白的运输等途径使蛋黄中脂蛋白的结构和组成发生变化,从而改变蛋黄加热过程中分子间的重组方式,增加蛋黄固化后的硬度及弹性,最终导致“橡皮蛋”的产生。