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鹿茸草为玄参科鹿茸草属植物绵毛鹿茸草(Monochasma savatieri Franch.)的干燥全草,又名“龙须草”、“白头翁”等,分布在我国江苏、江西、福建、浙江等地,具有清热解毒、凉血止血、祛湿止痛的功效,临床用于治疗感冒,咳嗽,上呼吸道感染,吐血及风湿骨痛等疾病,是中药保护品种炎宁颗粒的主要成分之一。本课题组已从鹿茸草中分离出12种苯乙醇苷类化合物,鹿茸草中的总苯乙醇苷具有一定程度的抗炎活性。为了明确鹿茸草的抗炎作用物质基础,并为进一步的生物活性研究提供足够样品,本文考察了鹿茸草中三种苯乙醇苷(Acteoside,Isoacteoside,Torenoside B)的分离制备工艺,并对其抗炎活性进行了研究。首先建立RP-HPLC同时测定鹿茸草中Acteoside,Isoacteoside 和 TorenosideB含量的分析方法。结果显示,Acteoside线性范围为0.59～4.51μg,R2=0.9999,Isoacteoside线性范围为0.61～4.65μg,R2=0.9997,Torenoside B 线性范围为0.54～4.66μg,R2=0.9998样品的平均回收率分别为100.20%、97.92%和97.18%,,方法精密度、重现性良好,结果准确可靠。通过静态吸附及解吸附实验和动态分离实验研究8种典型大孔树脂(AB-8,D101,HPD100,LSA-10,LX-11,LX-17,LX-38,XDA-6)的分离特性,得出最理想的大孔树脂。其中LX-17,LX-38的对Acteoside,Isoacteoside 和 TorenosideB静态吸附以及解吸附效果较好,可达到:25.85,43.38,31.32 mg/g,以及25.63,34.60,30.96mg/g。解吸附率均到达90%以上。选择LX-17,LX-38进行动态吸附解吸附实验,结果发现LX-17的吸附与解吸附效果均好于LX-38。所以选择LX-17来考察这三种化合物的理想树脂的最佳参数。结果显示上样浓度为1.8g/mL的原药材浓度为这三种物质的最佳上样浓度。上样吸附时间为210min是最佳吸附时间。用30%的乙醇去考察穿透量实验发现,其穿透量为1.67BV(柱体积)。其洗脱条件:乙醇浓度为0%(4BV),15%(4BV),35%(5BV)以及90%(2BV)。随后按比例放大10倍进行中试,选择上述理想参数作为实验条件,得到总苯乙醇苷部位。最后,通过动态轴向压缩制备柱纯化出各单体成分。本文通过LPS诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,建立体外炎症细胞模型,采用 Griess 法去考察 Acteoside,Isoacteoside 和 Torenoside B 对 LPS 诱导 RAW264.7细胞释放NO量的影响。结果发现,与模型组相比较,40和20μM的Acteoside,Isoacteoside和Torenoside B对NO的释放有明显的抑制作用,差异性比较明显(P<0.01),而 10μM 的 Acteoside,Isoacteoside 和 Torenoside B 对 NO 的释放却没有明显的抑制作用。MTT实验结果显示,40,20和10μM的Acteoside,Isoacteoside和Torenoside B对RAW264.7的生长没有影响。