中药复方是中医治病的主要临床应用形式,复方中的化学成分是中药发挥药效作用的物质基础。进行复方化学成分和配伍关系的研究,在阐明中医的方药理论,揭示中药的配伍规律和作用机制,优化制剂工艺,制定质控标准,实现中医药现代化并走向国际市场等方面均具重要意义。本课题通过对银翘清肺配方全方配伍前后化学成分的定性、定量和HPLC图谱分析,以及不同药味之间配伍关系的研究,考察配伍对本方化学成分的影响,探讨该方配伍应用的科学性,为其配伍机理的进一步深入研究提供基础,并提供一种研究的方法与思路。 在文献研究的基础上,采用正交设计法优化复方的提取工艺;采用薄层色谱法对配伍前后提取液的不同溶剂萃取部分进行定性分析;以高效液相法测定本方配伍前后主要有效成分绿原酸和连翘苷的含量变化,并对比其HPLC图谱在配伍前后的差异;通过不同配伍组的TLC、HPLC鉴别比较,考察各药味对有效成分含量的影响。 实验结果表明: 1、以绿原酸含量和浸膏得率为指标,采用正交实验优化提取工艺,所得醇提工艺的优化条件为:A₃D₂B₃C₂,即使用10倍量的70%的乙醇,提取2次,每次提取2小时。 2、通过配伍前后提取液的不同溶剂萃取部分的薄层色谱图的比较,发现多数主要成分在配伍后未发生明显改变;部分化学成分的含量在配伍后发生了较大变化,并与配伍方式有关。 3、以HPLC法进行含量测定:以方中君药金银花、连翘的主要化学成分绿原酸、连翘苷为定量分析指标:合煎液中绿原酸含量比单煎混合液低10%左右,而连翘苷含量略低于单煎混合液。 4、HPLC图谱分析:整体分析合煎液与单煎混合液的峰形峰貌基本一致,十个共有