嗜酸性粒细胞阳离子蛋白抗体的制备及初步应用

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嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)是一组由不同种类组成的碱性蛋白质,被广泛应用于过敏性患者临床检验的标志分子,也是酸性粒细胞活性和更新的一个指标。本实验以ECP为抗原,制备了多克隆抗体和单克隆抗体,经辛酸-硫酸铵和蛋白亲和层析及浓缩后,多克隆抗体和单克隆抗体效价均达到1:10~7。初步建立了基于ECP的双抗夹心ELISA方法,其检测范围为10ng/ml-900ng/ml,检测下限为5ng/ml。将方法应用于戊型肝炎患者血清样本进行检测,其中:戊型抗原Ag阳性样本9个,IgG阳性样本100个,IgM阳性样本72个,普通健康人群血清样本10个。检测结果:戊肝阴性样本ECP水平最高,其次为戊肝IgG阳性样本,Ag阳性样本ECP水平较低,IgM阳性样品ECP水平最低。t检验结果显示:IgM、Ag阳性样本两者差异显著,有统计学意义(P<0.005),而戊肝IgG阳性样本与戊肝阴性样本无统计学意义(0.10<P<0.25),戊型肝炎病毒可能抑制了嗜酸性粒细胞的活性,因而戊型肝炎早期阳性血清样本中ECP的含量较低,感染后期接近健康水平阳性血清样本中ECP的含量接近阴性血清,该实验结果国内首次报道。本结果为进一步研究嗜酸性粒细胞ECP的释放水平与戊型肝炎病毒感染的相关性与及做为戊型肝炎的一种早期诊断标志物提供了实验基础。
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