基于环糊精修饰技术甘草黄酮纳米海绵载药系统的构建及初步药效学研究

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甘草黄酮为一种从甘草中提取的黄酮类化合物,药理作用广泛。但近年来研究发现其水溶性较差,进而影响其体内生物利用度,限制了临床应用。本文基于环糊精修饰技术,以甘草黄酮为模型药物,制备了甘草黄酮环糊精纳米海绵,优化制备工艺,并对其理化性质和初步药效学进行研究,以改善其溶解性能和溶出度,实现了环糊精纳米海绵与中药有效部位的结合,以期为该技术应用于中药有效部位的可行性及普适性提供一定的参考。本文首先建立了模型药物甘草黄酮原料药的体外分析研究方法。分别采用紫外分光光度法和高效液相色谱法对原料药中甘草黄酮的含量和甘草苷的含量进行了测定。在2015版《中国药典》的指导下,建立了甘草黄酮环糊精纳米海绵的体外溶出度的测定方法。同时,基于对药物使用安全性方面的考虑,建立了过程中关键杂质苯酚的高效液相色谱含量测定方法,以使其质量符合相关规定。采用搅拌-冷冻干燥法制备了甘草黄酮环糊精纳米海绵。在单因素试验的基础上,基于多指标权重系数思维的指导,以载药量和粒径为指标,以综合评分值对各项结果进行加权,采用Box-Behnken响应面法对制备工艺进行优化。最终得到最佳制备工艺为搅拌温度45℃,搅拌时间4.8 h,搅拌速度245 r·min-1,最优条件下的综合评分值OD为94.78。在此最优条件下对工艺进行验证,实测综合评分值与预测值相差较小。对甘草黄酮环糊精纳米海绵的理化性质进行考察,测定其载药量、分散的平均粒径和增溶倍数,并采用目测、扫描电镜(SEM)、差示扫描量热(DSC)、傅里叶红外光谱(FT-IR)以及X射线衍射(XRD)对药物进行表征,考察其体外溶出性能,最后采用影响因素试验验证制剂的稳定性。结果显示,甘草黄酮环糊精纳米海绵的载药量、平均粒径以及增溶倍数结果均较优。目测和扫描电镜证实,甘草黄酮环糊精纳米海绵形态良好,在不同倍数电镜下,甘草黄酮环糊精纳米海绵呈现不同状态。差示扫描量热、傅里叶红外光谱和X射线衍射实验在证明甘草黄酮环糊精纳米海绵形成的同时,也证明药物在环糊精纳米海绵中以无定型状态存在。体外溶出试验显示,甘草黄酮环糊精纳米海绵在不同pH环境下的释放度差异显著,环糊精纳米海绵能显著提高甘草黄酮原料药的溶出度。影响因素试验表明,甘草黄酮环糊精纳米海绵在高温(60°C)和强光照射(4500±500Lx)下性质稳定,但应于较为干燥环境中密封保存。以4%乙酸诱导小鼠溃疡性结肠炎模型,分别设置空白组、造模组、甘草黄酮原料药组和甘草黄酮环糊精纳米海绵组,从小鼠的平均体重变化率、小鼠结溃疡结肠面积、结肠湿重系数以及结肠大体形态评分四个不同方面,对甘草黄酮原料药和纳米海绵复合物的初步药效学进行了研究,结果证实甘草黄酮环糊精纳米海绵可用于溃疡性结肠炎疾病的治疗,且疗效显著。
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