本研究分为如下三部分： 第一部分： 背景：蛋白激酶C(proteinkinaseC，PKC)在癌变过程中的作用使其成为肿瘤治疗的潜在重要靶点；非小细胞肺癌(non-smallcelllungcarlcer，NSCLC)中存在PKC-α的异常表达和活性增高。 目的：探讨PKC-α在NSCLC组织及细胞株中表达的意义。 方法：应用免疫组织化学SP方法检测NSCLC组织芯片中PKC-α蛋白的表达，其中肿瘤组织160例，痛旁组织40例，Ⅰ期91例，Ⅱ～Ⅲ期69例；应用反转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测NSCLC细胞株A549、耐顺铂A549(A549-DDP)、H460及H1299等细胞株中PKC-αmRNA的表达；应用Western印迹法检测上述细胞株中PKC-α蛋白的表达。 结果：PKC-α蛋白在160例NSCLC组织中的表达率为53.1％(85/160)，癌旁组织中的表达率为7.5％(3/40)，差异有统计学意义(P＜0.01)；PKC-α蛋白的表达在不同病理类型之间(腺癌、鳞癌及细支气管肺泡癌)的差异无统计学意义(P＞0.05)；与患者的性别、年龄等因素亦无明显相关性；而与NSCLC，特别是腺癌的临床分期、淋巴结是否转移相关(P＜0.05)；与腺癌的分化程度相关(P＜0.05)，但与鳞癌的分化程度无明显相关性；在NSCLC细胞株A549、A549-DDP、H460及H1299中均存在PKC-αmRNA及蛋白的表达，其中以A549-DDP细胞株的表达水平为最高。 结论：在NSCLC组织及细胞株中存在PKC-α的表达；PKC-α蛋白表达在NSCLC特别是腺癌的浸润、转移和发展中具有重要作用：在多种NSCLC细胞株中PKC-α的表达水平存在一定差别。 第二部分： 背景：蛋白激酶C(PKC)在癌变过程中的作用使其成为肿瘤治疗的潜在重要靶点。非小细胞肺癌(NSCLC)中存在PKC-α的异常表达和活性增高，PKC抑制剂能通过诱导肿瘤细胞凋亡、增强细胞毒作用及下调多药耐药基因的表达而发挥其抗肿瘤作用。 目的：通过观察PKC抑制剂白屈菜红碱(chelerythrinechloride，CH)对四种人NSCLC细胞株药物敏感性的影响，初步探讨其作用机制。 方法：以PKC抑制剂CH分别处理四种NSCLC细胞株H1299、H460、A549及耐顺铂A549细胞株，反转录聚合酶链反应法(RT-PCR)及蛋白印迹法(Westernblot)检测PKC-α的mRNA及蛋白表达水平，流式细胞仪检测细胞凋亡率，四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞株对顺铂的药物敏感性。 结果：用药前A549/DDP细胞株中PKC-αmRNA及蛋白的表达水平高于NSCLC细胞株H1299、H460及亲本A549细胞株(P＜0.05)，CH处理后四种NSCLC细胞株中PKC-αmRNA及蛋白的表达水平均有不同程度的下降，CH处理4h及24h后H1299、H460、A549细胞株的凋亡率无明显增加，仅A549/DDP细胞株的凋亡率明显增加，用药后NSCLC细胞株对顺铂的药物敏感性即IC50值有不同程度的下降，以A549/DDP细胞株降低更为明显(P＜0.05)。 结论：四种NSCLC细胞株中存在PKC-αmRNA及蛋白的高表达。通过抑制NSCLC细胞株中PKC-αmRNA及蛋白的表达，PKC抑制剂CH能增加其对顺铂的药物敏感性。与亲本A549细胞株相比，PKC抑制剂CH能通过抑制耐顺铂A549细胞株中PKC-α蛋白的表达及增加细胞凋亡率，而更有效地增加其对顺铂的药物敏感性。 第三部分： 背景：蛋白激酶C(PKC)在癌变过程中的作用使其成为肿瘤治疗的潜在重要靶点。非小细胞肺癌(NSCLC)中存在PKC-α的异常表达和活性增高，PKC抑制剂能通过诱导肿瘤细胞凋亡、增强细胞毒作用及下调多药耐药基因的表达而发挥其抗肿瘤作用。 目的：初步探讨PKC抑制剂白屈菜红碱(CH)与化疗药物顺铂(DDP)联合应用在NSCLC治疗中的作用及其可能的机制。 方法：应用MTT试验及流式细胞术分别检测CH与DDP联用对人NSCLC细胞株A549的增殖和凋亡的影响；裸鼠移植瘤实验检测CH与DDP联用对A549细胞成瘤性的影响：免疫组织化学SP法检测移植瘤组织中Bcl-XL及Bax蛋白的表达。 结果：CH可抑制NSCLC细胞株A549的增殖，浓度增加其细胞毒作用亦增强，CH与DDP联用呈协同或相加作用；CH、DDP及CH+DDP组A549细胞的凋亡率均高于对照组(P＜0.05)，且CH+DDP组A549细胞的凋亡率又分别高于CH组及DDP组(P＜0.05)；裸鼠移植瘤体内实验表明CH及DDP均可抑制移植瘤的生长，CH+DDP组的抑瘤率高于CH组及DDP组(P＜0.05)；CH组及CH+DDP组移植瘤组织中Bcl-XL蛋白的表达水平低于对照组，而Bax蛋白的表达水平高于对照组，其Bcl-XL/Bax的比值明显低于对照组(P＜0.05)。 结论：CH与DDP联用对A549细胞、裸鼠移植瘤有显著的协同抗肿瘤作用，该作用可能是通过增强对A549细胞增殖的抑制以及诱导其凋亡来实现的。