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目的:研究免疫补体调节蛋白C1INH调节修饰巨噬细胞向经典活化巨噬细胞(M1)和选择性激活巨噬细胞(M2)的极化作用。方法:首先从人血中分离单核细胞后,单核细胞扩大培育,经M-CSF或GM-CSF的诱导作用下转变为静态巨噬细胞;静态巨噬细胞在干扰素-γ(IFN-γ)或白细胞介素4(IL-4)+IL-13刺激作用下分别转化为M1或M2。通过流式细胞仪观察C1INH对巨噬细胞CD14、CD163、CD206表型标志物的作用;应用RT-PCR分析C1INH对巨噬细胞细胞因子、趋化因子、相关酶基因表达影响;通过Western Blot,探讨在炎症条件下C1INH对巨噬细胞CD14结合Toll样受体4(TLR4)的影响;从蛋白质和mRNA水平,进一步探讨C1INH调节巨噬细胞DNMT3b是通过改变Sp3活性。结果:C1INH 抑制 M-CSF 源性 M1 的 CD14、CD163 和 GM-CSF 源性 M2 的 CD206表型。C1INH减少M1的肿瘤坏死因子(TNF-α)和IL-6表达,而增加M2的15脂氧合酶(ALOX15)和IL-10表达。C1INH抑制M1的诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA,而提高M2的精氨酸酶1(ARG1)mRNA表达。C1INH促进M1的杀菌活性和M2对菌的吞噬功能。C1INH阻断CD14—TLR4介导信号传导通路。C1INH加强了 DNA整体水平甲基化,激活转录因子Sp3,控制与DNA甲基转移酶(DNMT)相关联的一种亚型DNMT3b的活性,从而提高了 DNA甲基转移酶(DNMT)的活性。此外我们证明了C1INH通过改变转录因子Sp3,影响与之相关联的DNA甲基化和DNMT3b活性。结论:C1INH抑制炎症反应是通过调节巨噬细胞极化作用,主要表现:(1)巨噬细胞极化表面标志物再分布;(2)巨噬细胞与炎症相关的成分如细胞因子、趋化因子、相关酶基因表达改变;(3)巨噬细胞生物学活性的改变如吞噬功能和杀菌作用;(4)巨噬细胞内炎症信号途径的改变;(5)巨噬细胞表观遗传学的改变如DNMT3b。