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目的：疼痛包含两种成分：疼痛的感觉分辨(sensory-discriminative)和疼痛的情绪反应(emotional-affective dimensions)。已有资料表明,有不同的中枢机制和神经传导通路介导了疼痛的感觉成分和情绪部分。人类和动物研究发现前扣带皮层(anterior cingulate cortex,ACC),尤其是吻侧ACC (rostral ACC, rACC)在疼痛相关的情绪行为方面发挥着重要的作用。切除大鼠双侧的rACC可以避免痛情绪引起的动物的条件性位置回避。一些临床和动物实验的研究表明,电针刺激可以缓解人和动物的痛情绪反应；而已有的资料和我们过去的工作显示,传统的中医针灸或现代的电针治疗可激活体内的阿片系统缓解疼痛。因此,我们推测激活rACC内神经元的阿片受体,可能会缓解伤害性刺激带来的痛情绪反应。我们用完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant, CFA)诱导的条件性位置回避(conditioned place avoidance, CPA)和疼痛行为的观察(热缩足反射潜伏期,PWL)结合rACC内给予μ-阿片受体的激动剂DAMGO和拮抗剂CTOP,观察激活rACC内μ-阿片受体是否可对外周伤害性刺激引起的痛情绪具有缓解作用,并试图对其机制进行一些探讨。方法：1、CFA诱导的条件性位置回避模型(CPA)的建立。将成年雄性SD大鼠(体重250～270克)随机分为3组：(1)空白对照组；(2)足底注射0.08ml NS组；(3)足底注射0.08ml CFA组,每组n=6～8。通过将CFA诱导的持续性疼痛与环境相耦合,比较条件适应前后大鼠在“疼痛环境”停留时间的变化和回避分数(CPAScore)的大小,来判断CFA是否可以诱导产生条件位置回避。2、用CFA诱导的条件位置回避模型衡量痛情绪反应。实验分为5个大组,11个小组,每组n=6～9。第一组：足底注射NS, rACC注射NS；第二组：足底注射CFA, rACC注射NS；第三组：足底注射CFA, rACC分别注射0.05/0.1/0.5/1(μg/μl) DAMGO;第四组：足底注射CFA, rACC注射10nmol CTOP+1(μg/μl) DAMGO;第五组：足底注射NS, rACC分别注射0.05/0.1/0.5/1(μg/μl) DAMGO。3、热缩足反射潜伏期(Paw Withdrawal Thermal latency, PWL)的检测：在CPA的第一天和第二天行为训练结束后分别对以上各组大鼠进行PWL的检测,观察ACC注射不同剂量DAMGO后大鼠的热痛行为反应。4、通过ACC脑区切片,进行μ受体及NR2A/NR2B荧光双标共定位和western-blot检测NMDA受体和NR2A/NR2B亚基的磷酸化水平。结果：(1)足底注射CFA诱导大鼠产生CPA反应空白对照组(Pre286.1士38.62s VS Post297.6士75.02s,P>0.05,n=6)和足底注射生理盐水组(Pre301.6±76.4s VS Post291.34±109.8s,P>0.05,n=7),大鼠第三天在“疼痛环境”匹配室的时间和第一天相比都没有显著性差异。两组回避分数间没有差别(P>0.05)。足底注射CFA后(Pre304.1±39.8s VS Post156.5±80.2s,P<0.05,n=8),大鼠第三天在“疼痛环境”匹配室时间明显小于第一天,因而对环境产生厌恶反应。(2)rACC内注射DAMGO反转了CFA诱导的CPA反应足底注射NS及rACC内注射NS的大鼠第三天在“疼痛环境”匹配室的时间与第一天在“疼痛环境”匹配室的时间相比没有显著性差异,回避分数比较小。没有产生对环境的厌恶(Pre325.9±106.6s VS Post313.7±169.6s,P>0.05,n=9).足底注射CFA及rACC内注射NS的大鼠第三天在“疼痛环境”停留的时间明显小于第一天在“疼痛环境”的时间,回避分数比较大,产生情绪反应(Pre331.4±48.66s VS Post146.7±129.4s,P<0.05,n=7)。足底注射CFA,rACC内分别注射不同剂量的0.05/0.1/0.5/1(μg/μl)DAMGO,当rACC注射很小的剂量0.05(μg/μl)时,DAMGO就发挥了作用,表现为大鼠第三天在“疼痛环境”匹配室时间和第一天没有明显差别,并未形成CPA反应(Pre348.7±48.62s VS Post334.6±109.2s,P>0.05,n=7)；而随着DAMGO剂量的增加,回避分数都很小,且各组间没有显著性差异(P>0.05)。作为对照,足底注射NS及rACC内分别注射不同剂量的0.05/0.1/0.5/1(μg/μl)DAMGO,各组回避分数都很小,组间没有明显差异(P>0.05),没有形成CPA反应。(3)rACC内注射CTOP取消了DAMGO对CPA的抑制作用足底注射CFA后,预先rACC内给予μ-阿片受体的拮抗剂CTOP,再注射DAMGO(Pre343.4±81.64s VS Post153.6±67.17s,P<0.05,n=6),大鼠第三天在“疼痛环境”停留的时间明显小于第一天在“疼痛环境”的时间,回避分数比较大。(4)足底注射CFA,大鼠的热痛行为发生改变足底注射CFA后,各组大鼠PWL与基础值相比明显缩短(P<0.05)。注射NS后,各组大鼠PWL与各自基础值相比,没有明显的变化(P>0.05)。(5)DAMGO不改变CFA引起的热痛行为足底注射CFA,rACC注射DAMGO的各组大鼠PWL也明显缩短(P<0.05),作为对照,足底注射NS,rACC注射DAMGO的各组大鼠PWL没有明显变化(P>0.05)。(6)rACC内μ阿片受体和NMDA受体共表达通过免疫荧光染色可以看出rACC神经元上μ-阿片受体和NMDA受体的NR2A或NR2B亚基都有表达。Western-blot目前数据没有完善,有待后续的补充。结论：(1)大鼠在注射CFA后,在产生痛行为的同时引起了痛情绪反应(CPA)。(2) rACC内μ-阿片受体的活化可以缓解疼痛引发的痛情绪,较小的剂量0.05μg/μl就可以发挥作用；较大的剂量也没有引起大鼠的位置偏爱。(3) rACC内μ-阿片受体的激活缓解痛情绪的作用并不是通过抑制痛感觉来实现的。(4)在rACC内μ-阿片受体有可能通过NMDA受体调节神经元的功能活动。