【摘 要】
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目的:FK506结合蛋白12.6(FK506 binding protein 12.6,FKBP12.6),属于FKBP蛋白家族成员之一,是免疫抑制剂FK506的胞内作用靶点。FKBP12.6由108个氨基酸组成,分子量为12.6KD,
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目的:FK506结合蛋白12.6(FK506 binding protein 12.6,FKBP12.6),属于FKBP蛋白家族成员之一,是免疫抑制剂FK506的胞内作用靶点。FKBP12.6由108个氨基酸组成,分子量为12.6KD,生理状态下能够与内质网和肌浆网上的RyR2结合,稳定钙离子通道,进而减少内质网和肌浆网中钙离子外泄;同时FKBP12.6与FK506结合,则可抑制钙调磷酸酶(CaN)活性,从而抑制免疫反应。FKBP12.6主要分布于心肌、脑组织和平滑肌等。FKBP12.6在中枢神经系统有着广泛的表达,包括一些与学习记忆相关的脑区,如海马、杏仁核;然而,其在学习记忆方面的功能还不清楚。本文旨在研究FKBP12.6敲除对新物体识别记忆、物体位置识别记忆及条件恐惧记忆的影响,并从电生理和蛋白表达方面探讨其可能的作用机制。方法:1.对小鼠尾部DNA进行基因鉴定,判断其是否成功敲除FKBP12.6基因。2.依据小鼠对新事物的探究特性建立实验模型,研究FKBP12.6敲除小鼠和WT(野生型)小鼠在新物体识别记忆和物体位置识别记忆上的差异。3.通过依据巴甫洛夫条件反射原理建立的恐惧记忆测试系统,研究FKBP12.6敲除小鼠和WT小鼠在条件恐惧记忆上的差异。4.通过膜片钳技术,研究FKBP12.6敲除小鼠和WT小鼠杏仁核神经元在电生理性质上的差异。5.通过免疫组化方法,研究FKBP12.6敲除小鼠和WT小鼠记忆相关脑区c-fos蛋白表达水平的差异。结果:1.实验中所用的小鼠确定已成功敲除FKBP12.6基因。2.与WT小鼠相比,FKBP12.6敲除小鼠的新物体识别记忆、物体位置识别记忆和条件恐惧记忆均下降。3.与WT小鼠相比,FKBP12.6敲除小鼠脑部杏仁核区域微小抑制性突触后电位(miniature inhibitory excitatory post synaptic potential,mIPSP)的频率没有显著变化,微小兴奋性突触后电位(miniature excitatory post synaptic potential,mEPSP)的频率显著下降。4.与WT小鼠相比,FKBP12.6敲除小鼠脑部杏仁核区域c-fos蛋白表达水平明显下降。结论:FKBP12.6基因敲除会损伤小鼠的新物体识别记忆、物体位置识别记忆和条件恐惧记忆;初步结果表明杏仁核mEPSP和c-fos蛋白表达水平的变化可能与条件恐惧记忆的损伤有关。
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