青叶胆片中齐墩果酸对獐芽菜苦苷药代动力学的影响

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目的:通过HPLC法考察獐芽菜苦苷与齐墩果酸的配伍稳定性;LC–MS/MS法测定大鼠血浆中獐芽菜苦苷含量,并应用于大鼠体内齐墩果酸对獐芽菜苦苷药代动力学影响研究,为进一步阐明獐芽菜苦苷的吸收代谢机理提供参考。方法:(1)建立HPLC法测定獐芽菜苦苷与齐墩果酸含量。分别在常温和37℃按10:1(基于青叶胆片中药物含量)配伍,于pH7.4左右的磷酸盐缓冲溶液中并在0h、1h、1.5h、3h、4h和6h考察獐芽菜苦苷与齐墩果酸之间的相互作用。(2)以SD大鼠为研究对象,采用LC–MS/MS及PPT法建立并确证大鼠血浆中獐芽菜苦苷含量测定的方法。(3)比较口服(獐芽菜苦苷20mg/kg给药、齐墩果酸2mg/kg给药)和尾静脉注射(獐芽菜苦苷2mg/kg给药、齐墩果酸0.2mg/kg给药)獐芽菜苦苷单体及獐芽菜苦苷-齐墩果酸联合两种给药形式下药物的体内药代动力学过程。结果:(1)HPLC法分别考察常温和37℃条件下,按10:1配伍于pH7.4左右的磷酸盐缓冲溶液中放置0h、1h、1.5h、3h、4h和6h后,獐芽菜苦苷与齐墩果酸之间没有发生相互作用。(2)建立并确证LC–MS/MS法测定大鼠血浆中獐芽菜苦苷含量,方法专属性强、灵敏度高、精密度和准确度好、基质效应符合分析要求、回收率高,适用于大鼠血浆中獐芽菜苦苷含量的测定。(3)獐芽菜苦苷单体口服给药后,Cmax为1222.9±623.8μg/L、AUC0-∞为3262±1665μg/L.h、CLz为7.558±3.486L/h/kg、T1/2为0.939±0.313h;獐芽菜苦苷-齐墩果酸混合口服给药后,Cmax为839.7±488.78μg/L、AUC0-∞为2246±1234μg/L.h、CLz为10.82±4.271L/h/kg、T1/2为1.009±0.397h。獐芽菜苦苷单体尾静脉给药后,Cmax为11079±2463μg/L、AUC0-∞为4002±1035μg/L.h、CLz为0.53±0.14L/h/kg、T1/2为1.25±0.42h;獐芽菜苦苷-齐墩果酸联合尾静脉给药后,Cmax为10576±2034μg/L、AUC0-∞为3381±712μg/L.h、CLz为0.61±0.12L/h/kg、T1/2为0.90±0.17h。结果显示,齐墩果酸对獐芽菜苦苷的药代动力学行为有一定程度影响。其中,雌雄对比后发现,雌性大鼠的吸收明显高于雄性,而尾静脉给药基本无差异,提示齐墩果酸可能影响獐芽菜苦苷的体内吸收过程;且这种影响在雄性个体中更为明显。结论:獐芽菜苦苷和齐墩果酸在体外配伍稳定。LC-MS/MS测定大鼠血浆中獐芽菜苦苷的方法稳定可靠,灌胃给药时齐墩果酸对獐芽菜苦苷体内吸收过程有一定程度影响并存在性别差异。
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