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目的:目前非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease NAFLD)的发生日益增加。NAFLD包括从肝脏脂肪变性到脂肪性肝炎,进而发展为肝脏纤维化,最终至肝硬化的一系列病变。但是目前尚没有药物可以治疗NAFLD。胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1 GLP-1)是由肠道内分泌细胞L细胞分泌的一种重要的肠促胰岛素,GLP-1类似物利拉鲁肽作为降糖药物已广泛的应用于临床,其胰腺外作用是目前糖尿病领域关注的热点。GLP-1受体介导的抗脏器纤维化作用已得到初步证实,其机制非常复杂,在不同的脏器可能存在不同的作用通路,并且一些参与脏器纤维化的关键细胞如肝星状细胞(hepatic stellate cells HSC)等最有可能参与其中。那么作为肝纤维化的关键细胞HSC上是否存在GLP-1受体的表达呢?本实验旨在探讨GLP-1受体在大鼠HSC是否表达及GLP-1类似物利拉鲁肽对高糖条件下大鼠HSC的作用,从而探讨其对于NAFLD及肝脏纤维化的作用。方法:1大鼠HSC的培养:大鼠HSC复苏后接种于无菌塑料培养瓶中,37℃、体积分数为5%的CO2饱和湿度培养箱中常规培养,培养液为含体积分数为10%胎牛血清的1640,每天换液1次,48小时后提取样本于显微镜下进行形态学鉴定,并进行后续实验分析。2 Western法检测GLP-1受体蛋白在大鼠HSC的表达。3 Real-time PCR法检测大鼠HSCGLP-1受体m RNA的表达。4分组干预:将培养48小时的大鼠HSC分7组分别为正常糖对照组(5.5mmol/L)、高渗对照组(5.5mmol/L低糖+19.5mmol/L甘露醇)、高糖对照组(25.0mmol/L)、高糖+低浓度利拉鲁肽组(50nmol/L)、高糖+中浓度利拉鲁肽组(100nmol/L)、高糖+高浓度利拉鲁肽组(200nmol/L)、正常糖+高浓度利拉鲁肽组(200nmol/L)。5 MTS法检测上述7组细胞的增殖情况。6数据分析:所得数据采用均数±标准差(sx?)表示,统计分析运用SPSS 13.0软件。采用方差分析对各个时间点的7组的光密度(optical density OD)值进行比较,采用Bonferroni法进行两两比较,探讨同一时间点具体不同的组的差别。对不同时间点的高糖+高浓度利拉鲁肽采取配对t检验,探讨时间对该组OD值得影响。P<0.05为统计学差异有意义。结果:1大鼠HSC形态学鉴定倒置显微镜下可以观察到活化的HSC为扁平状,胞体大,胞体周围有突起。2 Western blot及Real-time PCR检测GLP-1受体均在大鼠HSC上有表达。5个样本均测得GLP-1受体蛋白及m RNA表达。3 HSC的增殖:高糖组与正常糖组差异有统计学意义(p<0.05)。高糖+高浓度利拉鲁肽干预组作用48小时、72小时时较高糖对照组增殖降低(p<0.05),但高于正常糖对照组(p<0.05),高浓度利拉鲁肽组(200nmol/L)增殖低于低(50nmol/L)、中(100nmol/L)浓度利拉鲁肽组(p<0.05),但低、中浓度的利拉鲁肽组增殖差异无统计学意义(p>0.05)。高渗对照组及正常糖+高浓度利拉鲁肽组同正常糖对照组比较增殖差异无统计学意义(p>0.05)。结论:1大鼠HSC上有GLP-1受体的表达。2高糖可促进大鼠HSC增殖,而利拉鲁肽可抑制高糖作用下其增殖,并与其浓度和作用时间紧密相关。