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目的:检定 8-溴-7-甲氧基白杨素(8-bromo-7-methoxychrysin,BrMC)对肝星状细胞活化和肝癌相关星状细胞条件培养基诱导SMMC-7721细胞肝癌干细胞样细胞特性作用;探讨其机制是否涉及阻断STAT3/Twist 信号轴。方法:体外培养人肝癌SMMC-7721细胞系细胞,干细胞培养基超低粘附板悬浮培养和扩增肝癌干细胞样细胞(LCSLCs),BrMC(0、5、10、20μmol/L)处理LCSLCs,以制备肝癌干样细胞条件培养基(LCSLC-CM)和BrMC/肝癌干细胞样细胞条件培养基(BrMC/LCSLC-CM)。体外培养人肝星状细胞LX-2,LCSLC-CM处理作为肝癌相关星状细胞(LCAHSCs)模型,并制备LCAHSCs条件培养基(LCAHSC-CM)和BrMC/LCAHSC-CM;细胞免疫荧光染色和Western-blot分析LX-2细胞激活标志蛋白α-SMA和FAP表达;STAT3特异性抑制剂葫芦素Ⅰ(JSI-124)处理LCAHSCs,western blot分析检测其p-STAT3和Twist蛋白表达水平;肿瘤球形成率测定法、Western blot分析、划痕法和Transwell小室侵袭试验分别检测细胞自我更新能力、上皮-间充质转化(EMT)和干细胞标志蛋白表达、迁移和侵袭能力。结果:LCSLC-CM病理性活化LX-2细胞为LCAHSCs,与LX-2细胞相比,肝癌相关星状细胞高表达FAP蛋白。LCAHSC-CM有效诱导SMMC-7721细胞自我更新、干细胞标志蛋白(CD133、CD44和ALDH1)表达、EMT、体外细胞迁移和侵袭。BrMC处理LCSLCs获取的BrMC/LCSLC-CM能以浓度依赖方式抑制LCAHSCs FAP蛋白表达,对α-SMA表达无明显影响;与LCAHSC-CM相比,BrMC/LCAHSC-CM以浓度依赖方式抑制LCAHSC-CM诱导的SMMC-7721细胞干细胞标志物(CD133、CD44和ALDH1)表达、肿瘤球形成、EMT、体外细胞迁移和侵袭。JSI-124以浓度依赖方式降低LCAHSCs STAT3磷酸化水平和Twist表达;同时,JSI-124与BrMC协同拮抗LCAHSC-CM对SMMC-7721细胞自我更新、干细胞标志蛋白(CD133、CD44和ALDH1)表达、EMT、体外细胞迁移和侵袭的诱导作用。结论:1.LCSLC-CM病理性活化肝星状细胞LX-2,使之具有肿瘤相关成纤维细胞表型,并且LCAHSC-CM诱导SMMC-7721肝癌干细胞样细胞特性。2.BrMC处理有效抑制LCSLC-CM病理性活化肝星状细胞作用和拮抗LCAHSC-CM诱导肝癌干细胞样细胞特性作用。3.阻断LCAHSCs STAT3/Twist1信号通路与BrMC抑制肝星状细胞病理性活化和拮抗LCAHSC-CM诱导肝癌干细胞样细胞特性作用相关。