研究背景：目前，随着中国经济和社会的快速发展，人民生活水平得到了显著的提高。饮食习惯也有了改变，高脂肪，高胆固醇的食物摄入量增加，生活节奏的加快，工作压力大，体力活动减少，以及老龄化社会的发展，导致动脉粥样硬化的发病率逐年上升。动脉粥样硬化是大多数心血管疾病的潜在因素，动脉硬化多见于中老年男性和绝经期后的女性。此病常与高血压，高胆固醇和糖尿病相伴。脑力劳动者较多见，其对人民健康的危害是非常巨大的，由此产生的并发症已对中国老年人口的健康构成了严重的威胁。下肢动脉硬化闭塞症（ArteriosclerosisObliterans,ASO）是下肢动脉的一种退行性病变，病因在于动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）。近些年来，发病率逐渐上升。其临床表现为患肢皮温降低、怕冷、活动后易疲劳、间歇性跛行、静息痛、溃疡、坏疽，甚至威胁生命。已严重影响患者的生活质量。现阶段对ASO的相关治疗主要有药物治疗，手术治疗以及基因治疗和干细胞移植治疗等，但是总体治疗效果十分有限。目前，ASO的发病机制有脂质浸润学说，血流动力学理论，中膜平滑肌细胞增殖和内膜损伤理论等理论学说。近来国外学者研究表明ASO是感染、血脂紊乱、炎症反应等共同参与的慢性疾病。目前，深入研究ASO的发病机制以及疾病的进展，制定和改进其诊断、治疗的方法，努力实现ASO的尽早发现、尽早诊断、尽早治疗。减少患者并发症的发生率，提高患者的生活质量，已成为急需解决的问题。LP-PLA2是一种和AS有着紧密联系的被高度关注的磷脂酶A2超家族的一种。LP-PLA2是一种新的炎症酶，与心血管疾病的发生，发展有着重要的联系。其在血浆中主要与低密度脂蛋白(low-density lipoprotein，LDL)结合，能水解LDL，生成ox-FA和Lyso-PC，继而加速AS的发生和发展。研究显示LP-PLA2参与AS发生、发展的各个环节，在动脉粥样硬化斑块的形成、发展、破裂的过程中均扮演着重要的角色。正五聚体蛋白-3（pentraxin-3,PTX3）是国外学者最近研究发现的由381个氨基酸组成的五聚体结构蛋白，PTX3是构成长正五聚蛋白的主要成员，是一种急性期反应蛋白。目前，国内外学者研究表明炎症反应在AS的病理进程中有着举足轻重的作用。PTX3与冠状动脉粥样硬化斑块的易损性密切相关，在破裂的冠状动脉斑块中检测到了PTX3的高表达。然而，在ASO患者的股动脉粥样硬化斑块中，LP-PLA2和PTX3的表达水平是否存在变化，以及二者之间是否有一定关联性，目前未见相关文献报道。研究目的：探讨人股动脉粥样硬化斑块中LP-PLA2与PTX3的表达水平相互的变化及临床意义，以及两者之间的关系。希望进一步探讨ASO的发病机制。材料和方法：1.收集自2011年9月至2013年3月在郑州大学第二附属医院及河南中医学院第一附属医院血管外科行下肢股动脉内膜剥脱术后股动脉粥样硬化斑块标本31例（其中男性18例，女性13例，平均年龄：55.45±9.40岁），所有病例术前均有下肢缺血病史，并术前均经下肢动脉彩色多普勒和血管造影（CTA）等检查证实为下肢动脉硬化闭塞症。同时选取外伤股骨骨折损伤股动脉后，行股动脉自体大隐静脉搭桥术中切除的股动脉标本8例（男性5例，女性3例，平均年龄：50.50±8.85岁）作为对照组。术前排除门静脉高血压，动脉硬化，全身性炎症性疾病，肿瘤史。每位受试患者均签署《人体斑块组织科学研究同意书》。标本离体后迅速分成两等分，一份用10%甲醛溶液固定，另一份迅速放入液氮灌中，后转移至-80℃冰箱备用。2.对获取的标本进行HE染色，并根据其形态学差异将股动脉粥样硬化斑块分成稳定组（14例），不稳定组（17例）。另8例正常股动脉作为对照组。3.采用免疫组织化学SP法测定三组标本中LP-PLA2蛋白及PTX3蛋白的表达情况，并分析LP-PLA2蛋白及PTX3蛋白变化的意义以及二者彼此之间的关系。4.采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法分别检测三组中LP-PLA2mRNA及PTX3mRNA的表达情况，并分析LP-PLA2mRNA及PTX3mRNA变化的意义以及二者彼此之间的关系。5.统计方法:实验数据应用SPSS17.0软件进行统计学分析，相关结果以x±s表示，采用Kruskal-Wallis非参数秩和检验。三组间两两比较采用Bonferroni法，并应用Spearman进行相关分析，分析动脉硬化斑块组中LP-PLA2蛋白及PTX3蛋白表达的相关性，以及LP-PLA2mRNA及PTX3mRNA的表达相关性。检验水准α=0.05，以p<0.05有统计学意义。结果：一、免疫组织化学结果:1. LP-PLA2蛋白在斑块组织中均有较强的表达，在对照组中表达较弱。LP-PLA2蛋白表达呈棕黄色颗粒，主要分布在炎性细胞的细胞质中。三组中LP-PLA2蛋白的表达差异有统计学意义（χ2=32.554,P=0.000<0.001）。稳定斑块组(2.399±0.853）中LP-PLA2蛋白的表达高于对照组(1.043±0.061)(Z=2.191>Z0.017=2.1，P <0.05/3=0.017)，不稳定斑块组（6.142±0.472）中LP-PLA2蛋白的表达也高于对照组(1.043±0.061)(Z=5.418>Z0.017=2.1， P<0.017)，而不稳定斑块组（6.142±0.472）又高于稳定斑块组（2.399±0.853）（Z=3.736>Z0.017=2.1，P <0.017）。2.PTX3蛋白在斑块组织中均有较强的表达，在对照组中表达较弱。PTX3蛋白棕黄色颗粒主要分布在炎性细胞的细胞质中。三组中PTX3蛋白的表达差异有统计学意义（χ2=32.792P=0.000<0.001）。稳定斑块组（3.081±1.191）中PTX3蛋白的表达高于对照组(1.057±0.434)(Z=2.177>Z0.017=2.1，P <0.017)，不稳定斑块组（9.107±1.131）中PTX3蛋白的表达也高于对照组(1.057±0.434)(Z=5.421>Z0.017=2.1，P <0.017)，而不稳定斑块组（9.107±1.131）又高于稳定斑块组（3.081±1.191）（Z=3.768>Z0.017=2.1，P <0.017）。3.对斑块组织中LP-PLA2蛋白与PTX3蛋白的表达情况采用Spearman相关分析显示二者呈正相关（rS稳定组=0.959, r0.05,14=0.538， p<0.05； rS不稳定组=0.998,r0.05,17=0.485， p<0.05），在对照组中两种蛋白无相关性（|rS对照组|=|-0.236|,r0.05,8=0.738，p>0.05）。二、RT-PCR结果1.三组中LP-PLA2mRNA的表达量差异有统计学意义（χ2=31.973，P=0.000<0.001），LP-PLA2mRNA在不稳定斑块中的表达量最高（0.698±0.053），高于稳定斑块组（0.304±0.103）（Z=3.656>Z0.017=2.1，P <0.017），稳定斑块组中LP-PLA2mRNA的表达量（0.304±0.103）又高于对照组（0.102±0.037）（Z=2.262>Z0.017=2.1，P <0.017）。2.三组中PTX3mRNA的表达量差异有统计学意义（χ2=32.098，P=0.000<0.001），PTX3mRNA的表达量在不稳定斑块组最高（0.773±0.129），高于稳定斑块组（0.358±0.108）（Z=3.673>Z0.017=2.1，P <0.017），稳定斑块组（0.358±0.108)中PTX3mRNA的表达量又高于对照组（0.126±0.006）（Z=2.218>Z0.017=2.1，P <0.017）。3.相关性分析显示，斑块组织中LP-PLA2mRNA与PTX3mRNA的表达呈正相关（rS稳定组=0.995, r0.05,14=0.538，p<0.05；rS不稳定组=0.963, r0.05,17=0.485，p<0.05），两者的表达在对照组中无相关性（|rS对照组|=|-0.561|, r0.05,8=0.738，p>0.05）。结论：1.LP-PLA2和PTX3在人体股动脉粥样硬化斑块组织中高表达。2.LP-PLA2和PTX3的高表达可能与人体股动脉粥样硬化斑块的不稳定性有关。3.LP-PLA2和PTX3可能在人体股动脉粥样硬化斑块组织的不稳定性发病机制中存在协同效应。