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目的:1、观察来那度胺(lenalidomide,LEN)和阿司匹林(aspirin,ASA)联合对骨髓瘤细胞株增殖、凋亡与细胞周期的影响,分析两者在骨髓瘤细胞株中的相互作用。2、检测LEN和ASA联合对骨髓瘤细胞VEGF蛋白及wnt/β-catenin信号通路蛋白表达的影响,探讨ASA对LEN抗骨髓瘤的增敏机制。方法:1、常规培养骨髓瘤细胞株(MM1.S及RPMI-8226),制作细胞生长曲线,选取对数生长期细胞进行后续实验。2、采用CCK-8法检测LEN和ASA联合用药对MM1.S细胞和RPMI-8226细胞增殖的影响。3、采用Annexin V-FITC/PI染色方法检测LEN和ASA联合用药对MM1.S细胞和RPMI-8226细胞凋亡的影响。4、采用流式细胞仪检测LEN和ASA联合用药对MM1.S细胞和RPMI-8226细胞周期的影响。5、Western Blot法检测LEN和ASA联合用药对MM1.S细胞和RPMI-8226细胞VEGF蛋白、β-catenin及下游分子cyclinD1蛋白表达的影响。结果:1、药物作用24~72 h后,LEN与ASA联合以时间依赖性抑制细胞增殖活性,且显著高于LEN(1μM)及ASA(2.5 mM)单药组。相互作用分析显示:LEN与ASA在抗MM细胞增殖中呈协同作用。2、药物作用48 h后,LEN与ASA联合组对MM1.S及RPMI-8226细胞凋亡诱导率显著高于LEN或ASA单药组。3、药物作用48 h后,与LEN或ASA单药组相比,LEN与ASA联合组诱导MM1.S及RPMI-8226细胞阻滞于G1期比率明显增高。4、药物作用48 h后,相比LEN或ASA单药组,两者联合后显著下调了MM1.S及RPMI-8226细胞VEGF蛋白表达。5、在MM1.S与RPMI-8226细胞中,LEN作用72 h后诱导胞核内β-catenin蛋白及其下游cyclin D1蛋白表达上调,而ASA促使胞浆β-catenin磷酸化,导致胞核内β-catenin蛋白其下游分子cyclin D1蛋白表达下降。结论:1、阿司匹林与来那度胺在抑制骨髓瘤细胞增殖中呈协同作用;2、阿司匹林通过下调骨髓瘤细胞株VEGF表达对来那度胺发挥协同抗骨髓瘤作用;3、阿司匹林通过促进细胞浆β-catenin磷酸化,从而阻止β-catenin入细胞核发挥对来那度胺的化疗增敏作用。