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蜈蚣属于虫类中药材，具有镇静熄风、通络止痛之功效，中医学认为“其走窜之力最速，内而脏腑外而经络，凡气血凝聚之处皆能开之”。蜈蚣具有改善微循环、消除血栓、镇静止痛、抗炎、降压等作用。以蜈蚣为主要药味的复方在临床应用非常广泛，其复方制剂通心络等已证明对心肌缺血有显著疗效，能够改善心功能。但单味药蜈蚣有效部位抗心肌缺血的作用及其相关机制并不十分清楚，本文探讨通心络组成中的单味药蜈蚣有效部位抗心肌缺血的作用，为临床使用蜈蚣治疗心脏病提供实验依据。
一、建立精氨酸加压素诱导的大鼠冠脉痉挛心肌缺血模型
SPF级Sprague Dawley雄性大鼠，200～250克，32只，中山大学实验动物中心提供。随机分为四组：对照组、AVP-1组(0.2 IU/kg)、AVP—2组(0.5 IU/kg)、AVP—3组(1.0 IU/kg)，分笼饲养，实验前禁食12h。予腹腔注射20％乌拉坦麻醉(6 ml/kg)，其中AVP-1组颈静脉注射AVP0.2 IU/kg，AVP—2组颈静脉注射AVP0.5 IU/kg，AVP—3组颈静脉注射AVP1.0 IU/kg，对照组颈静脉注射1 ml/kg生理盐水，测量各组注射后10min内心电图ST段、S波、T波的变化幅度。2小时后各组大鼠心脏采血处死，取心脏作冰冻切片，观察病理改变。选取心肌缺血造模成功的AVP剂量。结果表明，AVP造模的最佳剂量是0.5 IU/kg。
二、蜈蚣有效部位抗心肌缺血的量效—时效观察
1)量效观察：雄性SD大鼠，分成模型组、蜈蚣有效部位各不同剂量组(0.15625、0.3125、0.625、1.25g/kg)，腹腔注射给药3d。各组在最后1d腹腔注射给药30min后颈静脉注射精氨酸加压素(0.5 IU/kg)，记录心电图观察ST段、S波、T波的幅度变化。结果表明，蜈蚣有效部位的最佳剂量为0.625g/kg。
2)时效观察：雄性SD大鼠，分成模型组、蜈蚣有效部位各不同给药时间组(1d、3d、5d)，给予剂量0.625g/kg。各组在最后1d腹腔注射给药30min后颈静脉注射精氨酸加压素(0.5 IU/kg)，记录心电图观察ST段、S波、T波的幅度变化。结果表明，蜈蚣有效部位的最佳给药时间是3d。
3)由以上结果得出：蜈蚣有效部位0.625g/kg腹腔注射3天可以得到最佳的抗AVP诱导的心肌缺血的作用。
三、蜈蚣有效部位抗心肌缺血的效应研究
雄性SD大鼠，分为对照组、模型组、蜈蚣有效部位组、一氧化氮合酶阻断剂组(以下称L—NAME组)。按上述蜈蚣有效部位的剂量和时间给予用药(0.625g/kg，3d)。最后1d腹腔注射给药30min后，腹腔注射20％乌拉坦麻醉(6ml/kg)，予颈静脉注射AVP，其中L—NAME组在注射AVP前20分钟注射L—NAME(10mg/kg)。观察各组血流动力学心功能指标。2小时后心脏采血，心脏组织用4℃生理盐水沈干净，吸水纸吸干置于—80℃冰箱备匀浆用。检测血浆NO含量、心肌组织SOD活性、MDA含量及血清心肌酶CK、LDH变化。结果表明，蜈蚣有效部位能提高LVSP，降低MAP，有效改善心脏收缩和舒张功能，升高血浆中NO的含量，增加心肌组织中SOD活力，降低心肌组织中MDA含量，使心肌酶CK、LDH活性降低。而L—NAME组能够抑制蜈蚣有效部位的抗心肌缺血的作用，与模型组效果接近。
四、蜈蚣有效部位抗心肌缺血的NO—NOS—NOSmRNA机制探讨
将第三部分各组大鼠心肌组织进行免疫组织化学实验观察eNOS蛋白的表达，进行RT—PCR实验观察心肌组织eNOSmRNA转录情况。
1)心肌组织eNOS蛋白的表达：结果显示，与对照组相比，模型组心肌中eNOS的阳性细胞面积有所下降，蜈蚣有效部位可明显升高心肌中eNOS的阳性细胞。提示蜈蚣有效部位可以升高心肌组织中的eNOS蛋白表达。
2)心肌组织eNOSmRNA转录：结果显示，与对照组相比，模型组的心肌细胞中eNOS的mRNA转录明显下降，蜈蚣有效部位可升高心肌细胞中eNOSmRNA的转录。提示蜈蚣有效部位可以增强eNOS的mRNA转录。
结论：
1)通过观察大鼠颈静脉注射不同剂量AVP后心电图的变化，以及心肌组织HE染色病理改变，探讨建立AVP诱导大鼠冠脉痉挛心肌缺血的模型。AVP造模最佳剂量是0.5 IU/kg。
2)探讨蜈蚣有效部位抗AVP诱导的心肌缺血的最佳剂量和作用时间。最佳剂量是0.625g/kg，最佳作用时间是3d。
3)蜈蚣有效部位能明显对抗AVP所致的心肌缺血损伤，能够提高LVSP、+dp/dtmax，降低MAP、LVEDP、—dp/dtmax，改善心脏收缩和舒张功能，升高血浆NO含量，提高心肌组织SOD活性，降低心肌组织MDA含量，降低血清CK、LDH活性。病理形态学表明蜈蚣有效部位能够改善心肌缺血导致的心肌细胞肿胀，减少炎症细胞浸润。上述结果表明，蜈蚣有效部位对AVP所致的大鼠心肌缺血具有显著的防治作用。
4)蜈蚣有效部位可以通过升高eNOSmRNA的表达水平，升高eNOS蛋白表达而增加NO的生成，实现抗心肌缺血的作用。
5)阻断实验表明一氧化氮合酶抑制剂L—NAME能够阻断蜈蚣有效部位抗心肌缺血的作用。