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目的探讨Toll样受体2和4（TLR2和TLR4）在α-干扰素（IFN-α）抗病毒效应中的作用以及抗病毒蛋白2’,5’-OAS和PKR在体外对抗HBV活性的研究。方法以人肝胚瘤细胞HepG2为细胞模型，通过LPS刺激并联合IFN-α处理细胞，以RT-PCR法检测细胞表面TLR2和TLR4的表达，再以Western blot和RT-PCR检测HepG2细胞中IFN-α JAK-STAT途径分子STAT1、STAT2和IRF9的表达，进一步分析IFN-α诱导的MxA、2’,5’-OAS、PKR等抗病毒蛋白的表达。以稳定转染HBV全基因组，并能分泌完整HBV病毒颗粒子的肝胚瘤细胞株HepG2.2.15细胞为细胞模型，将未处理的HepG2.2.15细胞作为空白组；将转染质粒pEGFP-2’,5’-OAS的HepG2.2.15细胞作为2’,5’-OAS组；将转染质粒pEGFP-PKR的HepG2.2.15细胞作为PKR组；将同时转染质粒pEGFP-2’,5’-OAS和pEGFP-PKR的HepG2.2.15细胞的作为共转染组。Western blot检测细胞内PKR和2’,5’-OAS蛋白的表达，电化学发光方法检测HepG2.2.15细胞分泌的HBsAg和HBeAg量；荧光定量PCR法检测上清液中HBV DNA的量。结果研究表明，HepG2细胞在LPS的刺激下，细胞表面TLR2、TLR4mRNA的表达水平升高（P＜0.05），而STAT1、STAT2、IRF9等相关信号转导分子的表达却无显著变化；与IFN-α单独处理相比，LPS和IFN-α联合处理HepG2细胞，可使细胞内JAK-STAT途径信号分子STAT1、STAT2、IRF9及抗病毒蛋白2’,5’-OAS、PKR表达增加（P＜0.05），而抗病毒蛋白MxA的表达水平无显著变化（P＞0.05）。HepG2.2.15细胞经质粒转染能够表达2’,5’-OAS、PKR蛋白，且2’,5’-OAS组和PKR组细胞上清液中HBsAg和HBeAg的量低于空白对照组（P＜0.05）。共转染组上清液中HBsAg和HBeAg的量明显低于空白对照组（P＜0.01）；不过，各组上清液中HBV DNA的表达无显著性差异。结论（1）HepG2细胞表面TLR2、TLR4被LPS刺激表达后，可影响细胞内IFN-αJAK-STAT信号转导途径，提高抗病毒蛋白PKR和2’,5’-OAS的表达，从而增强了IFN-α的抗病毒效应。（2）在体外，抗病毒蛋白PKR和2’,5’-OAS具有独立的抗HBV活性，两者在抗病毒效应上具有协同作用。