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目的:观察Sema4D在病毒诱发哮喘模型大鼠HPA轴功能紊乱中的作用,以及咳喘宁口服液调节Sema4D对模型大鼠HPA轴功能紊乱的影响,为进一步阐明咳喘宁口服液的整体调节作用机理提供实验依据。方法:幼龄Wistar大鼠72只,按随机数字表法选取12只作为正常组,其余组作为模型组,模型组按照幼龄大鼠RSV复合OVA哮喘模型方法造模,于致敏14天后,从正常组中及模型组中分别随机选取6只观察大鼠精神状态及心率、呼吸并检测气道高反应性判断模型是否成功。待哮喘模型造模完成后,将造模成功后的大鼠按随机数字表法分为9组,每组6只,即哮喘大鼠组(模型组)、哮喘大鼠Sema4D干预组(Sema4D组)、哮喘大鼠Sema4D抗体干预组(Sema4D抗体组)、哮喘大鼠低、中、高剂量咳喘宁干预组(咳喘宁Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组)、哮喘大鼠Sema4D+不同剂量咳喘宁干预组(联合Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组)。除正常组6只外,其余9组大鼠按分组情况分别予以药物干预:Sema4D组予以Sema4D腹腔注射,Sema4D抗体组予以Sema4D抗体腹腔注射,咳喘宁Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别给予咳喘宁低、中、高剂量灌胃,Sema4D+不同剂量咳喘宁干预组分别予以Sema4D腹腔注射及咳喘宁低、中、高剂量灌胃(按临床量效关系观察结果拟定咳喘宁口服液高剂量1ml/100g,中剂量0.3ml/100g,低剂量0.033ml/100g),每天1次,共14天。治疗结束后,采用免疫组织化学方法检测大鼠c-fos蛋白;采用放射免疫法检测大鼠PVN内SP的含量及ME中CRH和外周血中ACTH、CORT含量。结果:(1)哮喘发病时Sema4D对HPA轴的影响:(1)与正常组相比,Sema4D组大鼠脑内c-fos蛋白表达、PVN内SP含量升高,CRH含量、ACTH含量、CORT含量下降明显,差异有显著的统计学意义(P<0.01)。(2)与模型组相比,Sema4D组的SP含量明显升高,差异有显著的统计学意义(P<0.01),CRH含量降低,差异无统计学意义(P>0.05),外周血中ACTH含量、CORT含量明显下降,差异有显著的统计学意义(P<0.01),而Sema4D抗体组c-fos蛋白表达稍增高,CORT含量稍降低,差异无统计学意义(P>0.05),Sema4D抗体组SP含量明显降低,CRH含量、ACTH含量明显升高,差异有显著的统计学意义(P<0.01)。(2)咳喘宁调节Sema4D对模型大鼠HPA轴的影响:(1)与正常组相比,咳喘宁Ⅲ组c-fos蛋白表达稍升高,差异无统计学意义(P>0.05),其余各组的大鼠脑内c-fos蛋白表达、PVN内SP含量升高,差异均有显著的统计学意义(P<0.01);咳喘宁Ⅰ组及联合Ⅰ组的ACTH含量、CORT含量下降明显,模型组CRH含量、ACTH含量下降明显,联合Ⅱ、Ⅲ组ACTH含量均明显下降,Sema4D抗体组、咳喘宁Ⅱ组的CORT含量明显降低,差异均有显著的统计学意义(P<0.01),咳喘宁Ⅱ组的ACTH含量下降,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)与模型组相比,正常组、咳喘宁Ⅲ组、联合Ⅲ组c-fos蛋白的表达、SP含量明显下降,差异有显著的统计学意义(P<0.01),咳喘宁Ⅱ组的c-fos蛋白表达有所下降,差异有统计学意义(P<0.05),正常组、Sema4D抗体组、咳喘宁Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组、联合Ⅲ组CRH含量、ACTH含量及联合Ⅱ组的ACTH含量明显升高,差异有显著的统计学意义(P<0.01);(3)与Sema4D组相比,其他各组的c-fos蛋白表达、SP含量明显降低,差异有显著的统计学意义(P<0.01);各组的CRH含量、ACTH含量、CORT含量都有升高,除模型组CRH含量及Sema4D抗体组、咳喘宁Ⅰ组CORT含量外,其余均有显著的统计学意义(P<0.01);(4)与咳喘宁Ⅲ组相比,咳喘宁Ⅱ组c-fos蛋白表达、联合Ⅰ组的SP含量升高,差异有统计学意义(P<0.05),模型组、咳喘宁Ⅰ组c-fos蛋白表达、SP含量均明显升高,Sema4D抗体组、联合Ⅰ、Ⅱ组c-fos蛋白表达均有明显升高,正常组SP含量明显降低,差异有显著的统计学意义(P<0.01),咳喘宁Ⅰ组的CRH含量、ACTH含量、CORT含量,模型组CRH含量、ACTH含量及联合Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的ACTH含量明显降低,差异有显著的统计学意义(P<0.01),联合Ⅰ组的CRH含量、CORT含量及Sema4D抗体组CORT含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.哮喘发病时大鼠HPA轴功能受到抑制,咳喘宁口服液能改善HPA轴功能的抑制。2.Sema4D参与哮喘的发病过程,可能通过刺激大鼠脑内c-fos蛋白的表达及SP的释放而进一步抑制机体HPA轴内分泌激素的释放,从而加重哮喘。3.咳喘宁口服液可调节Sema4D对哮喘模型大鼠HPA轴功能的影响,其中咳喘宁中、高剂量组效果较佳,提示咳喘宁口服液可能是通过改善Sema4D对哮喘大鼠HPA轴的抑制而发挥哮喘治疗作用。