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温和气单胞菌是广泛存在于水体中的致病菌，能单独引起鱼类发病或与嗜水气单胞菌共同引起鱼类的败血病，给水产养殖业带来巨大的经济损失。迅速、准确地诊断疾病，检测出该病原菌，是防治该菌感染的关键。目前，国内外检测鱼类细菌性病原主要依赖于细菌培养鉴定和PCR检测，这两种方法均需要专业人员操作，操作复杂，费时，成本比较高，不便于在现场检测。本实验利用杂交瘤技术制备了5株可稳定分泌抗温和气单胞菌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，对其进行鉴定、纯化；在此基础上建立了检测温和气单胞菌的单抗胶体金试纸条法，从而达到快速、简单、方便检测温和气单胞菌的目的。 首先，以AS免疫Balb／C小鼠，四免后以AS包被酶标板，用间接ELISA法检测小鼠血清。尾静脉注射加强免疫后取效价最高的小鼠的脾脏细胞，利用50％ PEG 4000将其与SP2／O细胞进行细胞融合，制备杂交瘤细胞。经过对培养上清的筛选和杂交瘤细胞的克隆化，最终得到5株能分泌AS抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为：1A4、2C7、3G9、3D5和2G3。对制备的5株杂交瘤细胞进行特异性鉴定，结果显示2G3、1A4只与温和气单胞菌发生反应，与它参考菌株无反应，具有较强特异性。经单抗亚类试剂盒测定，3株单克隆抗体2G3、1A4和3G9蛋白均为IgG，亚类分别为：IgG2_b，IgG1，IgG1。间接ELISA测定2G3、1A4腹水效价分别为1×10~6、1×10~4。相加试验表明