【摘 要】
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该文研究软腐欧氏杆菌(Erwinia carotovora)分泌致病蛋白的Ⅲ型分泌系统的组分是否能识别梨火疫欧氏杆菌(Erwinia amylovora)存在于mRNA上的分泌识别信号.用PCR 的方法,将带
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该文研究软腐欧氏杆菌(Erwinia carotovora)分泌致病蛋白的Ⅲ型分泌系统的组分是否能识别梨火疫欧氏杆菌(Erwinia amylovora)存在于mRNA上的分泌识别信号.用PCR 的方法,将带有上游75bp可以在其mRNA 的5 端形成一个典型的作为Ⅲ型分泌识别信号的茎环结构的梨火疫欧氏杆菌的诱导植物过敏反应的harpin的基因hrpN,从带有hrp基因簇的质粒pCPP430上克隆到pGEM-T载体上,获得重组质粒pWGF1,经化学法转化到hrpN基因的转座突变体DH5a(pCPP430hrpN-)中,同时将pWGF1电击转化到胡萝卜软腐欧氏杆菌Se9R中,转化子的无细胞抽提物(CFEP)经Western-blot检测到harpin蛋白已被表达;带有双重质粒的DH5a(pCPP430hrpN-/pWGF1)在番茄植物上可以引起过敏反应,Se9R(pWGF1)在大白菜上和马铃薯上的致病力明显低于Se9R,初步表明一种植物病菌的harpin 蛋白可被另外一种病菌的Ⅲ型分泌系统所识别、分泌并保持生物活性.
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